Anticorpo Policlonal Anti-PYCRL para WB e ELISA - Q53H96

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PYCRL

• PYCRL (Pirrolina-5-carboxilato redutase 3), também conhecida como PYCR3, é uma enzima que catalisa a etapa final na biossíntese da prolina, responsável por converter pirrolina-5-carboxilato (P5C) em L-prolina usando NAD(P)H como cofator. Esta reação está especificamente ligada à via da prolina derivada da ornitina. Referências relacionadas: PMID:23024808 PMID:36414121
• A proteína está predominantemente localizada no citoplasma, onde atua no P5C citoplasmático gerado pelo catabolismo da ornitina.
• PYCRL é um membro da família da pirrolina-5-carboxilato redutase, juntamente com PYCR1 e PYCR2; no entanto, a PYCRL é exclusivamente dedicada à rota ornitina-prolina, enquanto as outras isoformas atuam principalmente na síntese de prolina derivada do glutamato.
• O splicing alternativo do gene PYCR3 produz múltiplas variantes de transcrito, que podem dar origem a isoformas proteicas com funções ou propriedades regulatórias alteradas.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, foram relatadas, potencialmente modulando a atividade enzimática ou a estabilidade.
• O peso molecular calculado da proteína PYCRL é de aproximadamente 28,7 kDa, consistente com a banda observada em 29 kDa em experimentos de western blot.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para ensaios de western blot (WB), prepare lisados celulares totais de linhagens celulares humanas ou de camundongo conhecidas por expressar PYCRL; espera-se uma única banda próxima a 29 kDa. Devido à natureza policlonal, múltiplas bandas podem aparecer se epítopos reativos cruzados estiverem presentes; considere o uso de bloqueio com peptídeo para confirmar a especificidade.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo pode ser empregado em ELISA direto ou sanduíche para quantificar PYCRL em amostras biológicas; faça titulação do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• A reatividade cruzada com PYCRL de camundongo foi demonstrada; para outras espécies, a análise de homologia de sequência pode orientar a reatividade potencial, mas a validação empírica é essencial.
• Dado que o imunógeno abrange os resíduos 13–286, é provável que o anticorpo reconheça múltiplos epítopos lineares e conformacionais; condições desnaturantes e redutoras no WB são geralmente compatíveis.
• Ao estudar o metabolismo da prolina, combine este anticorpo com inibidores da ornitina aminotransferase para modular os níveis de substrato da PYCRL e avaliar o fluxo da via.
• Sempre inclua controles apropriados, como linhagens celulares com knockout para PYCRL ou amostras tratadas com siRNA, para confirmar a identidade da banda.

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