mAb de Coelho contra Piruvato Carboxilase (PC) para WB e ELISA - P11498

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Piruvato Carboxilase

• A Piruvato carboxilase (PC) é uma enzima mitocondrial que catalisa a carboxilação dependente de ATP do piruvato em oxaloacetato, desempenhando um papel fundamental na gliconeogênese e na biossíntese de lipídios.
• A enzima realiza uma reação em duas etapas: primeiro, a carboxilação da biotina por meio da hidrólise de ATP; segundo, a transferência do grupo carboxila para o piruvato.
• Expressão tecidual específica: no fígado e no rim, a PC inicia a síntese de glicose; no tecido adiposo, no fígado e no cérebro, ela contribui para a síntese de lipídios.
• Codificada pelo gene PC, a proteína humana é uma carboxilase dependente de biotina e membro da família de enzimas multifuncionais.
• Localizada na matriz mitocondrial, a PC contém um peptídeo de trânsito para a importação mitocondrial.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e a proteína está associada a variantes patogênicas.
• Contém sítios de ligação para ATP, biotina e manganês, essenciais para sua atividade catalítica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) da PC humana; esta região é conservada em camundongos e ratos, o que coincide com a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 130 kDa; considere o uso de gel redutor e controles de carga adequados devido ao alto peso molecular.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado em formatos de detecção direta ou de captura; valide com PC recombinante ou lisados de tecidos onde a PC é altamente expressa (por exemplo, amostras de fígado ou rim).
• Como a PC é uma proteína mitocondrial, a preparação da amostra pode exigir protocolos de enriquecimento mitocondrial para uma detecção ideal.
• Devido à presença de biotina no alvo, evite reagentes de bloqueio contendo biotina se usar sistemas de detecção baseados em biotina para reduzir o ruído de fundo.

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