Anticorpo Policlonar Anti-QPCT para WB, IF/ICC, ELISA - Q16769

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da QPCT

• Identidade da proteína: QPCT (glutaminil-peptido ciclotransferase), também conhecida como glutaminil ciclase (QC, sQC) e glutamil ciclase, é uma enzima transferase secretada codificada pelo gene QPCT. Pertence à família das aciltransferases e contém um sítio ativo de ligação ao zinco.
• Função enzimática principal: Catalisa a formação de resíduos piroglutamila N-terminais a partir de precursores glutaminil ou glutamil, uma modificação crítica para a bioatividade e estabilidade de muitos peptídeos e proteínas.
• Especificidade de substrato: Apresenta preferência contra resíduos ácidos e triptofano imediatamente adjacentes ao glutaminil N-terminal, mas mostra pouca dependência do comprimento da cadeia peptídica além do segundo resíduo.
• Processamento do beta-amiloide: In vitro, converte peptídeos beta-amiloide truncados no terminal N (ex: [Glu-3]-beta-amiloide) em formas modificadas com piroglutamato, que são mais propensas à agregação e mais neurotóxicas.
• Relevância para doenças: Está implicada na doença de Alzheimer através da geração de peptídeos piroglutamato-beta-amiloide encontrados em placas senis; também pode participar de outras patologias relacionadas à amiloide.
• Localização subcelular: É secretada para o espaço extracelular, o que é consistente com seu papel na modificação de substratos extracelulares como hormônios, quimiocinas e peptídeos amiloide.
• Características estruturais: Contém pontes dissulfeto, sítios de glicosilação N-ligada e um peptídeo sinal; a proteína madura tem um peso molecular previsto de aproximadamente 40,9 kDa (observado em torno de 41 kDa).
• Splicing alternativo: O gene QPCT sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas; o imunógeno (sequência completa, aa 1-361) atinge todas as isoformas conhecidas que contêm essa região.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à proteína QPCT humana de sequência completa (aa 1-361), o que deve proporcionar ampla cobertura de epítopos e pode reconhecer tanto as formas precursoras quanto as maduras. A natureza policlonal pode aumentar a sensibilidade de detecção entre variantes de splicing.
• Para Western blot, é esperada uma banda específica perto de 41 kDa em condições redutoras. Como a QPCT é secretada, pode ser preferível analisar soro, plasma ou sobrenadantes de cultura celular em vez de lisados de células totais, dependendo do contexto experimental.
• Para IF/ICC, os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados para visualizar a QPCT nos compartimentos da via secretora; a coloração extracelular pode exigir condições não permeabilizantes. A co-localização com marcadores de Golgi ou vesículas pode ser avaliada.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo em formato sanduíche com um anticorpo de captura distinto; este anticorpo pode servir como reagente de detecção. A QPCT está presente na forma solúvel em fluidos biológicos, o que o torna adequado para ensaios quantitativos.
• A reatividade cruzada com QPCT de camundongo e rato permite a avaliação em modelos roedores de neurodegeneração. No entanto, a identidade da sequência de aminoácidos não é 100%, então a sensibilidade deve ser validada na espécie e sistema de tecido relevantes.

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