Anticorpo Policlonal Anti-RAB11B para WB, IF/ICC, ELISA - Q15907

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RAB11B

• A proteína relacionada a Ras Rab-11B (RAB11B), também conhecida como proteína de ligação a GTP YPT3, é um membro da superfamília Ras das pequenas GTPases. Ela cicla entre o estado inativo ligado a GDP e o estado ativo ligado a GTP, funcionando como um interruptor molecular no tráfego de membrana intracelular.
  Referências relacionadas: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• O RAB11B é um regulador chave da reciclagem endocítica, controlando a reciclagem apical de proteínas transmembranas como CFTR, ENaC, canais de potássio e canais de cálcio dependentes de voltagem do tipo L. Ele também governa vias secretórias constitutivas e reguladas, incluindo a exocitose de grânulos de insulina.
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• A proteína é essencial para o transporte e liberação de melanossomos a partir de melanócitos e modula o transporte intracelular da V-ATPase em resposta à acidose extracelular.
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• O RAB11B promove a ciliogênese formando um complexo de direcionamento ciliar com Rabin8/RAB3IP, ASAP1, RAB11FIP3 e ARF4, facilitando o tráfego vesicular pré-ciliar para o centríolo mãe. Por outro lado, a fosforilação de WDR44 mediada pela sinalização LPAR1 interrompe esse complexo, inibindo o crescimento dos cílios.
  Referências relacionadas: PMID:25673879, PMID:31204273

• Além disso, o RAB11B interage com RABL3 para impulsionar a formação de vesículas ciliares, destacando seus papéis multifacetados na montagem do cílio primário.
  Referências relacionadas: PMID:36052645

• Subcelularmente, o RAB11B está predominantemente associado a membranas de endossomos de reciclagem, mas também é encontrado em vesículas citoplasmáticas, vesículas secretórias, membranas de vesículas sinápticas e membranas de fagossomos, refletindo suas funções dinâmicas de tráfego.

• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, citrulinação, metilação e prenilação, regulam sua atividade, localização e interações proteicas. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e mutações estão ligadas à deficiência intelectual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 100–200 do RAB11B humano, que se encontra dentro de uma região provavelmente conservada entre espécies, consistente com a reatividade cruzada relatada para camundongo e rato. Este design baseado em peptídeo pode reconhecer conformações de proteína desnaturadas e nativas.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 24 kDa. Considerando que o RAB11B sofre prenilação e outras modificações, pequenas mudanças de tamanho ou bandas adicionais podem ser observadas em algumas amostras; valide com controles positivos como lisados celulares de HeLa ou HEK293.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, a permeabilização é tipicamente necessária para alvos intracelulares. Padrões de coloração endossomal e vesicular devem ser esperados, com possível enriquecimento nos endossomos de reciclagem.
• Para aplicações de ELISA, o peptídeo imunógeno pode servir como antígeno de revestimento, mas é aconselhada uma otimização cuidadosa da diluição do anticorpo e das condições de bloqueio.
• Como com qualquer anticorpo policlonal, a consistência lote a lote deve ser verificada usando um controle positivo padronizado. Considere validar no sistema de amostra relevante (humano, camundongo ou rato) para confirmar o desempenho.

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