Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Rab12 [Validado por KO] para WB e ELISA - Q6IQ22

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Rab12

• RAB12 é um membro da superfamília Ras de pequenas GTPases, atuando como um interruptor molecular que cicla entre as conformações inativas ligadas a GDP e ativas ligadas a GTP para regular o tráfego de membranas intracelulares.
• Desempenha um papel no transporte de proteínas dos endossomos de reciclagem para os lisossomos, facilitando a degradação de cargas como o receptor da transferrina.
• RAB12 participa da autofagia, se localizando nas membranas autofagossômicas e influenciando os processos autofágicos.
• No nível subcelular, RAB12 é encontrado nas membranas de endossomos de reciclagem, lisossomos, aparelho de Golgi e vesículas autofágicas.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais chave, incluindo prenilação para ancoragem na membrana, além de fosforilação e acetilação.
• Como GTPase, RAB12 se liga a nucleotídeos guaninos e íons magnésio, que são essenciais para sua atividade enzimática.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a sequência completa da proteína Rab12 humana (aa 1-244), o que sugere que o anticorpo pode reconhecer Rab12 nativo nas aplicações de Western blot e ELISA; valide usando controles positivos e negativos adequados no seu sistema de amostra específico.
• Para Western blot, considere usar lisados de linhagens celulares humanas e murinas (por exemplo, HeLa, NIH/3T3) e um controle de knockout para confirmar a especificidade, dada a designação [Validado por KO].
• No ELISA, titule o anticorpo contra a proteína recombinante Rab12 para determinar as concentrações de trabalho ideais e inclua uma curva padrão para análise semiquantitativa.
• Devido à bivalência do anticorpo, o desempenho do ELISA direto pode exigir pré-revestimento com antígeno recombinante; considere testar formatos indiretos para melhor sensibilidade.
• Rab12 tem um peso molecular previsto de 27 kDa; confira a migração da banda no peso esperado em condições redutoras e leve em conta possíveis modificações pós-traducionais que podem causar deslocamentos menores.

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