Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RAB14 para WB e ELISA - P61106

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RAB14

• RAB14 é um membro da família Rab de pequenas GTPases, que funcionam como reguladores chave do tráfego de membranas intracelular, desde a formação de vesículas até a fusão de membranas.
• A proteína cicla entre uma forma inativa ligada ao GDP e uma forma ativa ligada ao GTP, que recruta efetores downstream essenciais para a formação, movimento, fixação e fusão de vesículas.
• RAB14 está implicado no tráfego de membranas entre o complexo de Golgi e os endossomos durante o desenvolvimento embrionário inicial.
• Ele regula o transporte Golgi-endossomo de vesículas que contêm FGFR, uma via crítica para a deposição da membrana basal e a diferenciação das linhagens de epiblasto/endoderma primitivo.
• Junto com seu fator de troca de nucleotídeo guanina DENND6A, RAB14 controla o transporte endocítico de ADAM10, a clivagem de N-caderina/CDH2 e a adesão célula-célula.
  Referências relacionadas: PMID:22595670
• RAB14 medeia a fixação e fusão endossômica ao interagir com RUFY1 e RAB4B.
  Referências relacionadas: PMID:20534812
• Uma interação com RAB11FIP1 sugere um papel possível na formação de neuritos.
  Referências relacionadas: PMID:26032412
• RAB14 se localiza em endossomos de reciclagem, membranas de endossomos precoces, aparelho de Golgi, rede trans-Golgi, vesículas citoplasmáticas e fagossomos. Ele sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação e prenilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A sequência do imunógeno (aminoácidos 39 – 140 do RAB14 humano) está situada em uma região conservada em camundongo, o que provavelmente explica a reatividade cruzada observada. Ao projetar experimentos, verifique o alinhamento de sequência para qualquer espécie não listada.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 24 kDa, mas modificações pós-traducionais ou complexos proteicos podem alterar a migração aparente. Inclua controles positivos adequados (por exemplo, lisados de células humanas ou de camundongo) e considere o uso de condições redutoras/desnaturantes.
• Em ELISA, a natureza policlonal pode proporcionar alta sensibilidade. Otimize o antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo; usar o anticorpo como reagente de captura combinado com um anticorpo de detecção diferente pode reduzir o fundo.
• Anticorpos policlonais podem apresentar variação entre lotes. Para ensaios críticos ou quantitativos, é recomendável testar vários lotes e estabelecer procedimentos operacionais padrão.
• Garanta uma preparação adequada da amostra e etapas de bloqueio para minimizar a ligação não específica, especialmente ao trabalhar com matrizes biológicas complexas.

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