Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RAB31 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13636

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RAB31

• RAB31 codifica a proteína Ras-relacionada Rab-31 (também conhecida como Rab-22B), uma pequena GTPase pertencente à família Rab de reguladores-chave do tráfego de membranas intracelulares. Referências relacionadas: PMID:11784320
• A RAB31 alterna entre uma forma inativa ligada ao GDP e uma forma ativa ligada ao GTP, recrutando efetores a jusante que impulsionam a formação, transporte, ancoragem e fusão de vesículas.
• É necessária para a integridade estrutural e função normal do aparelho de Golgi e da rede trans-Golgi (TGN), e participa na translocação estimulada por insulina do GLUT4 para a membrana plasmática.
• A RAB31 media o tráfego do receptor de manose-6-fosfato (M6PR) da TGN para os endossomos e promove a internalização do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) nos endossomos.
• Nas células imunes, a RAB31 contribui para a maturação do fagossomo contra patógenos englobados, como Staphylococcus aureus e Mycobacterium tuberculosis.
• A localização subcelular inclui o aparelho de Golgi, a membrana da rede trans-Golgi, endossomos iniciais e membranas de fagossomos, refletindo seu comportamento dinâmico de ciclagem de membrana.
• A expressão mais alta é observada na placenta e no cérebro, com níveis mais baixos no coração e pulmão; é indetectável no fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e prenilação (lipoproteína) que provavelmente regulam a associação à membrana; a proteína é identificada em conjuntos de dados de proteômica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange a proteína recombinante de comprimento total (aa 1–195), que pode reconhecer tanto as conformações ligadas ao GDP quanto ao GTP; verifique a especificidade de ligação sob diferentes condições de nucleotídeos, se necessário.
• Para Western blot (WB), considere carregar controles positivos apropriados de lisados de tecido/células humanas, de rato ou de rato conhecidos por expressar RAB31 (por exemplo, cérebro, placenta). Espera-se uma banda próxima a 22 kDa.
• Na imunofluorescência/ICC (IF/ICC), como a RAB31 se localiza em compartimentos membranosos dinâmicos, use fixação suave (por exemplo, PFA a 4%) e co-marque com marcadores de organelos (TGN, endossomos iniciais) para confirmar a especificidade do sinal.
• Para ELISA, faça titulação tanto do anticorpo quanto do antígeno para determinar as concentrações ideais de trabalho; use uma proteína ou peptídeo RAB31 recombinante como antígeno de revestimento.
• Como o anticorpo é policlonal, a consistência entre lotes deve ser validada no sistema de amostra relevante.

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