Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-RAB45 para WB e ELISA - Q8IZ41

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína contendo Domínio Ras e EF-hand

• RASEF (RAB45) codifica uma Rab GTPase pertencente à superfamília RAS, caracterizada por uma combinação única de domínios Ras e EF-hand, e sofre splicing alternativo para gerar múltiplos isoformas.
• A função primária do RASEF é atuar como uma proteína adaptadora da dineína, ativando o transporte mediado por dineína e a motilidade dineína-dinactina em microtúbulos de uma forma independente de Ca(2+). Referências relacionadas: PMID:30814157
• O RASEF também regula a formação e triagem de grânulos de zimogénio e a secreção de enzimas digestivas pelas células acinares pancreáticas, contribuindo para a função exócrina do pâncreas.
• Subcelularmente, o RASEF localiza-se no citoplasma perinuclear, aparelho de Golgi, endossomas precoces e tardios, e lisossomas, indicando funções no tráfego intracelular de vesículas.
• A proteína contém motivos EF-hand de ligação ao cálcio e domínios de ligação ao GTP, e é regulada pela ligação de nucleótidos e fosforilação, conforme indicado pelas suas palavras-chave.
• A análise de especificidade tecidual mostra que o RASEF está regulado negativamente (down-regulated) em células de melanoma cutâneo, sugerindo um papel potencial na biologia dos melanócitos ou na supressão tumoral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio consiste nos 120 aminoácidos do terminal N (mapeados para o domínio semelhante a Ras), o que pode permitir o reconhecimento de epítopos conservados entre as espécies humana e de rato devido à alta homologia de sequência.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~83 kDa; considere usar lisados celulares totais de linhas celulares humanas ou de rato (por exemplo, HeLa, NIH/3T3) ou tecido pancreático, e valide com controles de carga apropriados.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para capturar ou detetar RAB45 recombinante ou endógeno; considere otimizar as condições de revestimento (coating) e verificar a especificidade usando padrões de proteína recombinante.
• Como é relatada reatividade cruzada para humano e rato, este anticorpo pode facilitar estudos translacionais; no entanto, confirme sempre a reatividade no sistema de amostra relevante antes de ensaios quantitativos.
• Dada a função da proteína como adaptadora da dineína, os investigadores podem explorar a sua utilidade em ensaios de co-imunoprecipitação ou de ligação de proximidade (proximity ligation assays) para estudar interações proteicas, embora estes não tenham sido validados para este produto.

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