Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RAB5B para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P61020

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RAB5B

• O gene RAB5B codifica a proteína Rab-5B relacionada a Ras, um membro da família Rab de pequenas GTPases que atuam como reguladores mestres do tráfego de membranas intracelulares.
• A proteína funciona como uma chave molecular, alternando entre um estado inativo ligado ao GDP e um estado ativo ligado ao GTP, recrutando proteínas efetoras específicas para mediar a formação, movimento, ligação e fusão de vesículas.
  Referências relacionadas:
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• A RAB5B desempenha um papel crítico no tráfego endocítico precoce: ela é necessária para o recrutamento do antígeno 1 de endossomo precoce (EEA1) aos endossomos nascentes, uma etapa chave na maturação dos endossomos.
  Referências relacionadas:
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• Ela é essencial para a endocitose e o tráfego adequado do fator de crescimento epidérmico (EGF) e da transferrina pelo compartimento de endossomos precoces.
  Referências relacionadas:
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• Subcelularmente, a RAB5B localiza-se predominantemente na face citoplasmática das membranas dos endossomos precoces, mas também é encontrada na membrana celular e nos melanosomos.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais incluindo acetilação, fosforilação e prenilação, que modulam sua atividade, ancoragem à membrana e interações com proteínas reguladoras.
• O splicing alternativo do gene RAB5B produz múltiplas isoformas, e a proteína é classificada como glicoproteína e lipoproteína com base em seu processamento pós-traducional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos resíduos 100–200 do RAB5B humano (NP_002859.1). Essa região é conservada entre humano, camundongo e rato, o que está de acordo com a reatividade multi-espécie observada. Os usuários devem validar o desempenho em seus próprios sistemas de amostras.
• Para Western blot, é esperada uma banda específica de ~24 kDa em condições redutoras; considere incluir controles positivos e negativos adequados (por exemplo, linhas celulares com expressão conhecida de RAB5B) para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imunofluorescência em parafina (IF-P), a RAB5B apresenta um padrão pontual de endossomo precoce. Recomenda-se a co-coloração com um anticorpo anti-EEA1 ou marcadores endossomais para verificar a localização.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser testado como reagente de captura ou detecção; no entanto, as diluições ideais e o pareamento com outros anticorpos devem ser determinados empiricamente.

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