Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-RAB8A para WB, IF/ICC, ELISA - P61006

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RAB8A

• RAB8A é uma pequena GTPase que cicla entre as conformações inativa ligada a GDP e ativa ligada a GTP, funcionando como reguladora principal do tráfego de membranas intracelular, transporte vesicular polarizado e liberação de neurotransmissores.
• Promove a transcitose de PODXL para os sítios de iniciação da membrana apical (AMIS), impulsionando a formação da superfície apical e a lumenogênese em conjunto com RAB11A, o complexo exocisto e proteínas de polaridade. Referências relacionadas: PMID:20890297
• Controla a morfologia compactada do aparelho de Golgi, influenciando assim a organização de Golgi e o processamento de carga. Referências relacionadas: PMID:26209634
• Colabora com MYO5B e RAB11A para estabelecer a polarização das células epiteliais, essencial para a arquitetura e função do tecido. Referências relacionadas: PMID:21282656
• Participa do tráfego de membranas para o cílio primário e é necessário para a ciliogênese, com implicações para a sinalização e o desenvolvimento. Referências relacionadas: PMID:21844891 PMID:30398148 PMID:20631154
• Desempenha papel na autofagia, contribuindo para o sequestro e degradação de componentes citoplasmáticos. Referências relacionadas: PMID:27103069
• Após estresse lisossômico, RAB8A é recrutada e estabilizada por meio de fosforilação mediada por LRRK2, suprimindo o aumento de tamanho lisossômico induzido por estresse por meio dos efetores EHBP1/EHNP1L1. Referências relacionadas: PMID:30209220
• Apresenta ampla localização subcelular, incluindo membrana plasmática, Golgi, endossomos, endossomos de reciclagem, cílio, fagossomos, centrossomo, corpo médio e lisossomos, refletindo suas funções versáteis de tráfego.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 140–207 da RAB8A humana (NP_005361.2), uma região que provavelmente gerará anticorpos que reconhecem tanto a forma de comprimento completo quanto possíveis variantes de splicing; verifique a especificidade usando controles relevantes (por exemplo, lysados de knockdown por siRNA ou knockout).
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 24 kDa com base no peso molecular calculado; use um gel SDS-PAGE de porcentagem adequada para proteínas de baixo peso molecular e considere a superexpressão ou enriquecimento para sinais endógenos fracos.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), é esperado um padrão de coloração consistente com a localização multifacetada da RAB8A (vesículas citoplasmáticas, Golgi, membrana plasmática, cílios); valide a colocalização com marcadores de organelas.
• Para ELISA, garanta a cobertura adequada do imunógeno recombinante ou proteína nativa de lysados de células/tecido e realize a titulação para otimizar a relação sinal-ruído.
• A reatividade cruzada com RAB8A de camundongo e rato está especificada; no entanto, a conservação do epitopo deve ser confirmada se você trabalhar com outras espécies ou membros da família RAB intimamente relacionados (por exemplo, RAB10, RAB13).

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