Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-RACK1 para WB, IF/ICC, ELISA - P63244

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RACK1

• RACK1 (Receptor da C Kinase 1 Ativada), também conhecida como GNB2L1, HLC-7 ou PIG21, é uma proteína de ancoragem e componente integral da subunidade ribossomal 40S. Ela contém múltiplos domínios de repetição WD que medeiam diversas interações proteína-proteína.
• Como parte do ribossomo, a RACK1 está envolvida na repressão traducional (PubMed:23636399) e inicia o controle de qualidade ribossomal (RQC), promovendo a ubiquitinação das subunidades 40S durante a tradução interrompida (PubMed:28132843). Referências relacionadas: PMID:23636399 PMID:28132843
• Ela se liga e estabiliza a proteína quinase C (PKC) ativada, potencializando a fosforilação mediada por PKC, e pode recrutar PKC para o ribossomo para fosforilar o EIF6, regulando assim a tradução.
• A RACK1 modula uma ampla gama de vias de sinalização e processos celulares, incluindo progressão do ciclo celular (prolonga a fase G0/G1), apoptose (promove a oligomerização de BAX), sinalização por integrinas e inibição da via Wnt.
• Subcelularmente, a RACK1 é encontrada no citoplasma, membrana celular, núcleo, região perinuclear, dendritos e bolsas fagocíticas, refletindo suas funções multifuncionais.
• No fígado, a RACK1 é expressa em níveis mais elevados nas células estreladas hepáticas ativadas do que nos hepatócitos ou células de Kupffer, e está upregulada em carcinomas hepatocelulares, o que a envolve na fibrose hepática e no câncer.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação. A RACK1 também participa de interações hospedeiro-vírus, como o aumento da fosforilação de Nef do HIV-1 e a remodelação de ribossomos para a tradução de mRNA do poxvírus.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 30–290 da RACK1 humana, cobrindo a maior parte da proteína, incluindo várias repetições WD. Espera-se que esse design gere anticorpos que reconhecem tanto as conformações nativas quanto as desnaturadas.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 35 kDa. Use condições adequadas de SDS-PAGE e inclua um controle de carga adequado.
• Em experimentos de IF/ICC, a RACK1 exibe localização citoplasmática, de membrana e nuclear. Considere otimizar as condições de permeabilização e fixação para detectar todas as frações.
• Ao realizar ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Valide seu desempenho com proteína RACK1 purificada ou lisados celulares relevantes na configuração do seu ensaio.
• O anticorpo reage de forma cruzada com a RACK1 de camundongo e rato, sendo adequado para estudos em modelos de roedores. Confirme a reatividade específica da espécie no seu sistema experimental.

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