Anticorpo Monoclonal Anti-Rad18 para WB e ELISA - Q9NS91

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Rad18

• RAD18 (também conhecido como RNF73, hHR18, hRAD18) é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 pertencente à família de proteínas de dedo RING. Contém um domínio de dedo de zinco do tipo RING essencial para sua atividade de transferase de ubiquitina.
• RAD18 desempenha um papel crítico no reparo pós-replicação do DNA danificado por UV, mediando o preenchimento de lacunas na fita filha durante a replicação do DNA danificado.
• Forma um complexo com a enzima conjugadora de ubiquitina E2 UBE2B para catalisar a mono-ubiquitinação do antígeno nuclear de célula proliferante (PCNA) associado ao DNA no Lys-164.
• RAD18 possui atividade de ligação a DNA de fita simples (ssDNA), o que pode facilitar seu recrutamento para locais de dano no DNA.
• Subcelularmente, o RAD18 localiza-se principalmente no núcleo, mas também pode ser encontrado no citoplasma e no centrossomo dentro do centro organizador de microtúbulos.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, e forma ligações isopeptídicas como parte de seu mecanismo de ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-100 do RAD18 humano (Q9NS91), cobrindo a região N-terminal. Para o Western blot (WB), deve-se observar uma banda esperada em aproximadamente 56 kDa; considere o uso de controles de carregamento apropriados e valide a detecção em sua matriz de amostra específica.
• Devido à sua reatividade com humano, camundongo e rato, este anticorpo pode ser adequado para estudos entre espécies, mas recomendamos verificar a especificidade nas espécies relevantes por meio de controles positivos e negativos.
• Para aplicações de ELISA, o peptídeo imunógeno pode servir como antígeno de revestimento para o desenvolvimento do ensaio; otimize a concentração de revestimento e a diluição do anticorpo para a melhor relação sinal-ruído.
• Não são fornecidas recomendações de diluição experimental; os pesquisadores devem titular o anticorpo para suas condições específicas de ensaio.

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