Anticorpo Monoclonal Anti-Rad23A para WB, IF/ICC, ELISA - P54725

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Rad23A

• A RAD23A, também conhecida como proteína de reparo por excisão UV RAD23 homóloga A (HR23A/hHR23A), é uma proteína multifuncional que participa na desmetilação da histona H4K20, reparo de DNA, degradação de proteínas dependente de ubiquitina, regulação transcricional e replicação viral. Referências relacionadas: PMID:12643283 PMID:14621999 PMID:15321727
• Ela desmetila especificamente as formas mono-, di- e trimetiladas da 'Lis-20' da histona H4 (H4K20me1, H4K20me2, H4K20me3) em formas não metiladas, o que ativa a transcrição de genes codificantes e elementos repetitivos. Referências relacionadas: PMID:32209475
• A RAD23A é crucial para o reparo por excisão de nucleotídeos (NER): ela forma um complexo com a XPC que demonstra atividade de NER in vitro, e estabiliza a XPC. Referências relacionadas: PMID:9372924
• Ela facilita a degradação de proteínas dependente de ubiquitina, ligando-se a cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lis-48' e entregando substratos ubiquitinados ao proteassoma 26S. Referências relacionadas: PMID:12643283 PMID:14621999 PMID:15321727
• A RAD23A desempenha um papel na replicação do HIV-1: é necessária para a associação da Vpr do HIV-1 com o proteassoma da célula hospedeira em células não proliferativas e macrófagos primários.
• Localização subcelular: predominantemente nuclear.
• A proteína sofre splicing alternativo e fosforilação, e contém domínios semelhantes à ubiquitina (Ubl).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região interna (aa 200–300) da RAD23A humana. O anticorpo pode detectar a RAD23A de comprimento total e potencialmente isoformas contendo esta região. Valide a especificidade no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 40 kDa. Otimize os controles de carga e a diluição do anticorpo para o seu lisado específico.
• Na imunofluorescência/ICC, espere marcação nuclear consistente com a localização da RAD23A. Use protocolos apropriados de fixação e permeabilização.
• Para ELISA, considere condições de revestimento com o peptídeo sintético ou proteína recombinante para avaliar a ligação. Realize testes de reatividade cruzada se aplicado a espécies não humanas/de camundongo.

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