Anticorpo monoclonal de coelho anti-RAD50 para WB, ELISA - Q92878

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de RAD50

• RAD50 (proteína de reparo do DNA RAD50), também conhecida como NBSLD ou hRad50, é um componente central do complexo MRN (MRE11-RAD50-NBN), que coordena as respostas celulares às quebras de dupla fita do DNA.
• O complexo MRN é essencial para o reparo de quebras de dupla fita por meio da recombinação homóloga, na qual medeia a ressecção das extremidades do DNA para gerar DNA de fita simples necessário à invasão da fita.
  Referências relacionadas:
  PMID:15064416
  PMID:21757780
  PMID:27889449
• RAD50 liga-se às extremidades do DNA e as mantém unidas, e sua mudança estrutural dependente de ATP controla a atividade nucleásica de MRE11, posicionando os substratos de DNA para a clivagem.
  Referências relacionadas:
  PMID:11741547
  PMID:12805565
  PMID:28134932
• Além da ressecção das extremidades, o complexo MRN ativa as quinases ATM e ATR para transmitir sinais de dano ao DNA, uma função independente da atividade nucleásica de MRE11.
  Referências relacionadas:
  PMID:15064416
  PMID:15790808
  PMID:16622404
• Nos telômeros, o complexo MRN modula a formação de estruturas em t-loop, contribuindo para a integridade e a regulação do comprimento dos telômeros.
  Referências relacionadas:
  PMID:10888888
• RAD50 também está envolvida no processamento de R-loops, resolvendo conflitos entre transcrição e replicação para manter a estabilidade genômica.
  Referências relacionadas:
  PMID:31537797
• Subcelularmente, RAD50 localiza-se principalmente no núcleo, associando-se à cromatina e aos telômeros.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade e suas interações em resposta a danos no DNA.
• A expressão nos tecidos é geralmente baixa, com enriquecimento notável nos testículos e níveis detectáveis em fibroblastos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo C-terminal (aa 1200-1300) localizado fora dos domínios ATPase e de hélice superenrolada conservados; considere verificar a especificidade por meio de controles de knockdown ou knockout em tipos de amostra relevantes.
• Na técnica de Western blot, RAD50 migra aproximadamente a 154 kDa; use uma porcentagem de gel adequada (por exemplo, gel de resolução a 6%) e garanta a transferência eficiente dessa proteína grande (por exemplo, utilizando tempos prolongados de transferência úmida).
• Relata-se que o anticorpo reage com RAD50 humano, de camundongo e de rato; a reatividade cruzada com a proteína endógena dessas espécies deve ser validada nas suas condições experimentais.
• Em aplicações de ELISA, as condições ideais de revestimento e as faixas de detecção devem ser determinadas empiricamente, utilizando o imunógeno peptídico ou a proteína recombinante de comprimento total como padrão.

CamelBio: sua ponte completa para aquisição

A CamelBio trabalha em parceria com fabricantes de diagnósticos e institutos de pesquisa para fornecer matérias-primas de alta qualidade para IVD, como este anticorpo monoclonal anti-RAD50, apoiando pesquisas sobre danos e reparo do DNA. Além de anticorpos, oferecemos pares de anticorpos validados, antígenos recombinantes e reagentes auxiliares em grandes volumes para agilizar o desenvolvimento de ensaios. Nossa rede integrada de aquisição também pode auxiliar na obtenção de matérias-primas para alvos raros, de acordo com suas necessidades específicas de diagnóstico ou pesquisa.