Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Rad51 para WB, ELISA, ChIP - Q06609

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína de Reparo de DNA RAD51 Homóloga 1 (RAD51)

• A RAD51 catalisa a troca de fita de DNA homóloga, uma etapa central no reparo de DNA por recombinação homóloga (HR), formando filamentos de nucleoproteína dependentes de ATP em DNA de fita simples (ssDNA). Referências relacionadas: PMID:12205100, PMID:12442171, PMID:15937124, PMID:17515904
• Ela reconhece a homologia entre parceiros de DNA homólogos e catalisa a troca de fita para formar moléculas conjuntas, ligando quebras de DNA processadas com modelos de reparo. Referências relacionadas: PMID:12205100, PMID:18417535, PMID:19303847
• A RAD51 é recrutada para garfos de replicação paralisados para resolver o estresse de replicação e participa no reparo de ligações cruzadas intercadeias. Referências relacionadas: PMID:27797818, PMID:31844045, PMID:26253028
• Sob estresse oxidativo, a RAD51 coopera com a RAD51C e a XRCC3 para regular o número de cópias do DNA mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:20413593
• Durante a meiose, a RAD51 atua como um fator acessório não catalítico para a recombinase DMC1, facilitando o pareamento cromossômico e o crossing over.
• A RAD51 localiza-se dinamicamente no núcleo, cromossomos, citoplasma, região perinuclear, matriz mitocondrial e centrossomo, refletindo seus papéis multifacetados no metabolismo do DNA.
• A RAD51 é altamente expressa em testículo e timo, com expressão moderada no intestino delgado, placenta, cólon, pâncreas e ovário, e expressão fraca na mama. Referências relacionadas: PMID:18417535
• A RAD51 sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação do tipo ubiquitina, que regulam sua atividade e interações proteicas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que cobre a região N-terminal (aa 1-100) da RAD51 humana; este epítopo é conservado em camundongo e rato, o que pode explicar a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot (WB), use condições redutoras e desnaturantes; espere uma banda em torno de 37 kDa. Otimize a diluição do anticorpo e as condições de detecção para o seu tipo específico de amostra.
• Para ELISA, considere emparelhar com um anticorpo de detecção contra um epítopo não sobreposto; valide com RAD51 recombinante ou lisados celulares.
• Em ensaios de ChIP, use reticulação apropriada (por exemplo, formaldeído) e otimize a sonicação; o enriquecimento de RAD51 pode ser induzido por agentes danificadores de DNA (por exemplo, etoposídeo).
• Este anticorpo foi relatado como reagente com humano, camundongo e rato; para outras espécies, verifique a homologia de sequência da região do imunógeno antes do uso.

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