Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Raf1 para WB, ELISA - P04049

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Raf1

• RAF1 codifica a serina/treonina-proteína quinase Raf1 (c-RAF ou Raf-1), um elo regulatório crítico entre as GTPases Ras associadas à membrana e a cascata MAPK/ERK, controlando decisões de destino celular como proliferação, diferenciação, apoptose, sobrevivência e transformação oncogênica.
• Após ativação, a Raf1 inicia a cascata MAPK fosforilando sequencialmente as quinases de dupla especificidade MAP2K (MEK1/MEK2) e subsequentemente as quinases reguladas por sinal extracelular (ERK1/ERK2).
• Além da via MAPK canônica, a Raf1 fosforila numerosos outros substratos, incluindo BAD (promovendo a sobrevivência celular), adenilil ciclases (ADCY2/5/6), PPP1R12A e troponina T cardíaca (TNNT2), modulando assim a apoptose, a sinalização de cAMP e a contração muscular.
• A Raf1 exerce efeitos anti-apoptóticos translocando-se para a mitocôndria, onde se liga à BCL2 e desloca a BAD pró-apoptótica, protegendo diretamente as células da morte.
• A quinase regula a sinalização de Rho e a migração celular, contribui para a cicatrização de feridas e conduz a transformação oncogênica de células epiteliais reprimindo a proteína de junção apertada ocludina (OCLN) via o repressor transcricional SNAI2/SLUG.
• Subcelularmente, a Raf1 localiza-se dinamicamente entre o citoplasma, a membrana celular, a mitocôndria e o núcleo, consistente com seus diversos papéis na sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aminoácidos 1–100), sugerindo que este anticorpo monoclonal pode reconhecer um epítopo dentro do domínio regulatório; verifique a reatividade em sua espécie alvo e tipo de amostra.
• Para western blotting (WB), a Raf1 é detectada aproximadamente em 73 kDa; considere usar linhagens celulares com expressão conhecida de Raf1 (por exemplo, HeLa, Jurkat) como controles positivos.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato implica conservação do epítopo, mas recomendamos validar a detecção nessas espécies sob suas condições experimentais específicas.
• Este anticorpo é validado para WB e ELISA; outras aplicações (por exemplo, IHC, ICC, IP) não foram testadas e exigiriam otimização e verificação pelo usuário final.

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