Anticorpo Policlonal Anti-Rap1B para WB, IF/ICC, ELISA - P61224

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Rap1B

• A Rap1B (proteína relacionada à Ras Rap-1b), também conhecida como proteína de ligação a GTP smg p21B, é membro da superfamília de pequenas GTPases Ras.
• Codificada pelo gene RAP1B (ID do Gene: 5908) em humanos, a proteína existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• A Rap1B possui atividade intrínseca de GTPase e funciona como um interruptor molecular na transdução de sinais, alternando entre os estados ativo ligado ao GTP e inativo ligado ao GDP.
• Desempenha um papel fundamental na polaridade das células endoteliais e na formação do lúmen vascular, contribuindo para a atividade de polarização de KRIT1 e CDH5.
• É necessária para a localização de PRKCZ, PARD3 e TIAM1 fosforilados nas junções celulares, estabelecendo assim a função basal da barreira endotelial.
• Subcelularmente, a Rap1B está localizada na membrana celular, no citosol e nas junções celulares.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo prenilação (modificação lipídica), fosforilação e metilação, que regulam sua associação à membrana e sua atividade.
• Clinicamente, as mutações em RAP1B estão associadas a variantes de doenças, destacando sua importância para a saúde humana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, use linhagens celulares humanas ou de camundongo conhecidas por expressar Rap1B (por exemplo, células endoteliais) como controles positivos; espera-se uma banda de aproximadamente 21 kDa.
• Na imunofluorescência/ICC, considere otimizar as condições de fixação e permeabilização para preservar a acessibilidade do antígeno, uma vez que a Rap1B está localizada na membrana celular e nas junções.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser testado contra a proteína Rap1B recombinante (como o imunógeno) para confirmar a ligação; faça uma titulação do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• Devido à sua natureza policlonal, o anticorpo pode detectar múltiplas isoformas de Rap1B ou membros relacionados da família Rap; valide a especificidade no sistema de amostra relevante.
• A reatividade cruzada foi relatada para humanos e camundongos; se forem utilizadas amostras de ratos, realize experimentos-piloto para verificar a reatividade.

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