Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-RARα para WB, IHC-P, ELISA - P10276

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RARα

• RARA codifica o receptor de ácido retinoico alfa (RARα), também conhecido como NR1B1, um receptor nuclear que funciona como um fator de transcrição dependente de ligante.
• RARα se liga ao ácido retinoico todo-trans e 9-cis e forma heterodímeros com os receptores X de retinoides (RXRs) para reconhecer elementos de resposta ao ácido retinoico (RAREs) nos promotores de genes alvo (PubMed:19850744, PubMed:20215566, PubMed:19398580). Referências relacionadas: PMID:19850744 PMID:20215566 PMID:19398580
• Na ausência de ligante, o heterodímero RXR-RAR recruta complexos corepressores, levando à desacetilação de histonas e repressão transcricional (PubMed:16417524). Referências relacionadas: PMID:16417524
• A ligação do ligante desencadeia a dissociação do corepressor e o recrutamento de coativadores, resultando na ativação transcricional de genes alvo (PubMed:19850744, PubMed:20215566, PubMed:37478846). Referências relacionadas: PMID:19850744 PMID:20215566 PMID:37478846
• RARα desempenha papéis críticos na espermatogênese, no crescimento esquelético e nas respostas do endotélio vascular ao estresse de cisalhamento (PubMed:28167758). Referências relacionadas: PMID:28167758
• A proteína se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, consistente com seus papéis duais na transcrição e na sinalização não genômica.
• RARα é expresso em monócitos e é classificado como um proto-oncogene; rearranjos cromossômicos envolvendo RARA são uma característica da leucemia promielocítica aguda (LPA).
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, ubiquitinação e formação de ligações isopeptídicas; a proteína contém domínios de ligação ao DNA do tipo dedo de zinco.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético da região N-terminal (aminoácidos 1-100) do RARα humano. Para western blot, uma banda em torno de 51 kDa é esperada; considere usar controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens celulares de LPA como NB4) e validar com knockdown por siRNA se for necessária confirmação de especificidade.
• O anticorpo é classificado para WB, IHC-P e ELISA. Para IHC-P, as condições de recuperação de antígeno podem precisar de otimização; sugere-se uma recuperação por calor padrão baseada em citrato ou EDTA. No ELISA, emparelhe com um anticorpo de detecção que reconheça um epítopo não sobreposto se usado em formato sanduíche.
• Reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada, mas os usuários devem verificar o desempenho em seus modelos específicos de tecido ou célula devido a possíveis diferenças específicas da espécie na expressão ou modificações pós-traducionais.
• Como o RARα pode se deslocar entre o núcleo e o citoplasma, o fracionamento subcelular ou a imunofluorescência podem complementar os estudos de localização.

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