Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-RARS para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P54136

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RARS

• A arginina--tRNA ligase, citoplasmática (nomes alternativos: Arginil-tRNA sintetase, ArgRS), é codificada pelo gene RARS1 (também conhecido como RARS) e pertence à família de aminoacil-tRNA sintetases de classe I. Ela catalisa a ligação dependente de ATP da arginina ao seu tRNA cognato, uma etapa essencial na tradução de proteínas nos ribossomos citoplasmáticos (PubMed:25288775).
  Referências relacionadas:
  PMID:25288775
• Forma parte de um complexo macromolecular com outras tRNA sintetases e proteínas acessórias, facilitando o canalamento eficiente de aminoacil-tRNAs para o ribossomo. Este complexo multi-sintetase aumenta a fidelidade e a velocidade da síntese proteica.
• Envolvido na secreção regulada e processamento do precursor AIMP1/p43. Modula a clivagem e liberação da citocina inflamatória EMAP2 (polipeptivo ativador de monócitos endoteliais 2) a partir da AIMP1, ligando a tradução à imunidade inata (PubMed:17443684).
  Referências relacionadas:
  PMID:17443684
• Localiza-se predominantemente no citosol e é enriquecido no compartimento citoplasmático, consistente com o seu papel na tradução e na montagem do complexo multi-sintetase. Não são relatadas isoformas nucleares ou específicas de organelas.
• Modificado pós-traducionalmente por acetilação, e o gene está sujeito a iniciação alternativa, produzindo isoformas com N-terminais distintos. Essas modificações podem regular a atividade enzimática, estabilidade ou formação de complexos.
• Mutações no RARS1 estão associadas à leucodistrofia, um grupo de distúrbios que afetam a substância branca do cérebro, sublinhando a importância deste gene no desenvolvimento e função neural. Seus papéis "moonlighting" (secundários) além da tradução destacam a sua versatilidade.
• As palavras-chave incluem aminoacil-tRNA sintetase, ligação de ATP, ligase, biossíntese de proteínas, acetilação e variante da doença, refletindo a sua função catalítica central e relevância clínica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os resíduos 1–300 do RARS humano. Esta região N-terminal pode conter epítopos lineares e conformacionais reconhecidos pelo anticorpo monoclonal em vários ensaios. Para WB, considere condições redutoras e não redutoras para avaliar a acessibilidade do epítopo.
• Como o alvo é citoplasmático, os protocolos de IF-P e IHC-P devem incluir uma etapa de permeabilização (por exemplo, 0,1–0,5% de Triton X-100) para detecção ideal. Valide a especificidade do anticorpo usando células ou tecidos de controle com níveis conhecidos de expressão de RARS.
• O anticorpo reage cruzadamente com o RARS de camundongo, permitindo o seu uso em sistemas de modelo de camundongo. No entanto, a homologia da sequência deve ser confirmada na região do imunógeno; um alinhamento BLAST pode informar a reatividade esperada em outras espécies.
• Para aplicações de ELISA, teste o par de anticorpos com antígeno recombinante ou lisados celulares nativos. Titule as concentrações do anticorpo de captura e de detecção para alcançar uma faixa dinâmica linear adequada aos seus requisitos analíticos.
• Como um monoclonal de coelho, ele geralmente oferece alta afinidade e consistência de lote para lote. Ainda assim, cada novo lote deve ser qualificado no seu ensaio de interesse, e as diluições de trabalho devem ser determinadas empiricamente para o seu tipo específico de amostra e protocolo.

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