Anticorpo Monoclonal Anti-RB para IHC-P e ELISA - P06400

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RB

• A proteína associada ao retinoblastoma (RB, também conhecida como p105-Rb, p110-RB1, pRb, pp110) é um supressor tumoral codificado pelo gene RB1 que atua como regulador chave da transição do ciclo celular G1/S. Referências relacionadas: PMID:10499802
• No seu estado hipofosforilado, o RB se liga aos fatores de transcrição E2F, bloqueia fisicamente o seu domínio de transativação e recruta enzimas modificadoras da cromatina para reprimir a transcrição de genes responsivos a E2F, evitando assim a entrada na fase S. Referências relacionadas: PMID:10499802
• A fosforilação do RB dependente de ciclina e CDK induz a sua dissociação dos E2F, ativando a transcrição dos genes alvo de E2F e desencadeando a progressão do ciclo celular. Além disso, a fosforilação mediada por CDK3/ciclina C promove a transição G0-G1. Referências relacionadas: PMID:10499802 PMID:15084261
• O RB contribui para a formação da heterocromatina e a manutenção da estrutura geral da cromatina ao recrutar histonas metiltransferases como SUV39H1, KMT5B e KMT5C, que catalisam a trimetilação da lisina 20 da histona H4, levando à repressão transcrição epigenética.
• A proteína está predominantemente localizada no núcleo, mas também pode ser detectada no citoplasma. A sua atividade é modulada por múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e metilação.
• O RB é expresso na retina e foi detectado a nível proteico em queratinócitos do prepúcio. Referências relacionadas: PMID:20940255
• No contexto de infecção viral, o RB é alvo de oncoproteínas como o grande antígeno T do SV40, o E7 do HPV e o E1A do adenovírus, que quebram o complexo RB-E2F1 e inativam a sua função de supressor tumoral.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região C-terminal (aa 701-928) do RB humano, por isso o anticorpo provavelmente reconhece epítopos dentro desse domínio. Considere usá-lo para detectar o RB completo e quaisquer isoformas que contenham a região C-terminal.
• Para IHC-P, métodos padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão de citrato, pH 6,0) podem ser adequados; no entanto, recomenda-se a otimização para cada tipo de tecido.
• Para ELISA, pode ser explorado o pareamento com um anticorpo de captura ou o revestimento direto com o imunógeno recombinante. Valide o desempenho na matriz de amostra relevante.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com o RB humano; a reatividade com outras espécies não foi testada e deve ser verificada experimentalmente, se necessário.

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