Anti-Rbm7 (Validado em KO) Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IP, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9CQT2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Rbm7

• Rbm7 (proteína de ligação ao RNA 7) é uma proteína de ~30 kDa contendo um motivo de reconhecimento de RNA que funciona como a subunidade de ligação ao RNA do complexo trimerico de direcionamento do exossomo nuclear (NEXT).
• O complexo NEXT direciona um subconjunto de RNAs não codificantes de curta duração para degradação exossomal, desempenhando um papel fundamental na vigilância e renovação de transcritos aberrantes e RNAs não codificantes.
• O Rbm7 liga-se preferencialmente a sequências poliuridílicas e associa-se a RNAs recém-sintetizados, incluindo pré-mRNAs, transcritos a montante do promotor (PROMPTs), RNAs intensificadores (eRNAs) e produtos estendidos 3' de pequenos RNAs nucleares (snRNAs).
• Participa da resposta a danos no DNA (DDR) interagindo com MEPCE e LARP7, subunidades centrais do complexo 7SK snRNP, levando à liberação do fator positivo de alongamento da transcrição b (P-TEFb) e transcrição de genes DDR, promovendo assim a viabilidade celular.
• Durante a resposta ao estresse, a ativação da via p38MAPK-MK2 diminui a ligação de RNA do Rbm7 e as atividades subsequentes de degradação pelo exossomo de RNA, modulando a renovação do transcriptoma não codificante.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, com presença no nucleoplasma.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação e fosforilação; palavras-chave também destacam papéis na meiose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi validado em modelos de camundongo knockout (KO), sendo adequado para confirmar a especificidade do alvo em amostras knockout versus tipo selvagem; inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Para Western blot (WB), uma diluição inicial de 1:1000 é comumente usada; otimize para o seu tipo de amostra. O peso molecular previsto é de 30 kDa; verifique o tamanho da banda com um marcador de peso molecular.
• A sequência do imunógeno (aa 87-265) é conservada entre camundongo e rato, consistente com a reatividade cruzada observada; a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada e requer validação individual.
• Para imunoprecipitação (IP), use um sistema de contas de proteína A/G e pré-limpe os lisados; note que proteínas de ligação ao RNA podem exigir condições de lise suaves para preservar interações.
• Para imunocoloração (IF-P, IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária; realize experimentos piloto em tecidos positivos conhecidos para otimizar as condições.
• Em ELISA, considere o uso da proteína recombinante Rbm7 como antígeno de revestimento para estabelecer uma curva padrão; valide a linearidade e o limite de detecção na configuração do seu ensaio.

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