Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-RBMX/hnRNP G para WB, ELISA - P38159

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RBMX/hnRNP G

• A RBMX (proteína com motivo de ligação a RNA, cromossomo X), também conhecida como hnRNP G (ribonucleoproteína nuclear heterogênea G) e glicoproteína p43, é um membro da família das hnRNP e uma importante proteína de ligação a RNA envolvida na regulação gênica pré e pós-transcricional.
• Ela atua como reguladora transcricional, ligando-se e estimulando o promotor do gene supressor de tumor TXNIP, o que sugere seu papel na supressão tumoral. A RBMX também coopera com a SAFB para ativar a transcrição de SREBF1.
• A RBMX é um componente do complexo suprasspliceossomo e regula o splicing alternativo, agindo como ativador ou repressor da inclusão de éxons. Por exemplo, ela promove a inclusão do éxon 7 do gene SMN2 de forma aditiva com a TRA2B e reprime o splicing do éxon 10 de MAPT/Tau.
• A proteína liga-se preferencialmente a RNA de fita simples com motivos ricos em 5'-CC[A/C] e se associa a mRNAs nascentes transcritas pela RNA polimerase II. Provavelmente se liga ao RNA como homodímero e exibe afinidade não específica por pré-mRNAs.
• No citoplasma, a RBMX participa do tráfego de TNFR1, promovendo a clivagem proteolítica mediada por IL-1β dos ectodomínios de TNFR1 e a liberação de vesículas do tipo exossomo de TNFR1 no espaço extracelular.
• Estudos de imunofluorescência e fracionamento subcelular localizam a RBMX predominantemente no núcleo, onde ela interage com cromatina, RNA nascente e fatores de splicing.
• O perfil de expressão tissular revela forte expressão proteica em queratinócitos orais normais, mas apenas detecção fraca em carcinomas espinocelulares orais, ligando sua redução ou perda à progressão tumoral.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação e conjugação do tipo ubiquitina, que podem regular sua atividade, localização e interações. Mutações ou desregulação da RBMX estão associadas a distúrbios neurológicos como deficiência intelectual, epilepsia e surdez.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal de 1 a 95 aminoácidos da RBMX humana, expressa como proteína de fusão recombinante. Ao planejar experimentos confirmatórios, considere usar este imunógeno como controle positivo em ELISA ou como peptídeo de bloqueio em ensaios de competição.
• No Western blotting, é esperada uma banda principal próxima a 42 kDa, consistente tanto com o peso molecular previsto de ~42,3 kDa quanto com o peso proteico relatado de 42 kDa. Inclua controles positivos adequados, como lisados de HeLa, HEK293 ou queratinócitos orais, e valide a detecção na sua matriz de amostra específica.
• Este anticorpo policlonado apresenta reação cruzada com a RBMX de camundongo; portanto, linhas celulares de camundongo ou lisados de tecidos podem ser avaliados em paralelo para verificar a especificidade e a adequação para estudos com modelos murinos.
• Para ELISA, considere usar proteína RBMX humana recombinante ou lisados de células como antígenos de revestimento, e testar o anticorpo em diluições determinadas empiricamente. Como qualquer reagente policlonado, o desempenho pode variar entre lotes, portanto, a validação no seu sistema experimental é recomendada.
• Dada a localização nuclear da proteína, frações enriquecidas em núcleo podem melhorar a intensidade do sinal em WB. Além disso, esteja ciente de possíveis modificações pós-traducionais que podem alterar o peso molecular aparente ou afetar a ligação do anticorpo.

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