Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-REST/NRSF para IF/ICC, ELISA - Q13127

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do REST/NRSF

• REST/NRSF, também conhecido como fator de transcrição de silenciamento RE1 ou fator silenciador restritivo neural, é um repressor de transcrição que se liga a elementos silenciadores restritivos neuronais (NRSE) para silenciar genes neuronais em células não neuronais. Ele recruta corepressores SIN3A e RCOR1, que por sua vez atraem histonas desacetilases para modificar a cromatina e impor a repressão. Referências relacionadas: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093
• REST recruta o complexo BHC para desacetilação e desmetilação de histonas, e pode formar um complexo repressor com CDYL e a histona metiltransferase EHMT2, o que está implicado na supressão da transformação. Referências relacionadas: PMID:19061646
• O Isoforma 3 (uma variante de splicing mais curta) exibe atividade repressora mais fraca e pode formar heterodímeros com REST de comprimento total, inibindo sua ligação ao DNA e o recrutamento de corepressor, desreprimindo assim os genes alvo. Esta troca de isoforma é crucial para a audição e ativação de genes neuronais. Referências relacionadas: PMID:11779185, PMID:11741002
• REST mantém o estado quiescente de células-tronco neurais adultas reprimindo genes neuronais; sua dissociação dos locais NRSE permite a diferenciação em neurônios maduros. Referências relacionadas: PMID:21258371
• Durante o desenvolvimento pós-natal, REST reprime a expressão de GRIN2B, facilitando uma troca na composição das subunidades do receptor NMDA sináptico de GRIN2B para GRIN2A (Por similaridade).
• Sob condições hipóxicas, REST atua como um repressor chave, ligando-se diretamente aos locais RE1/NRSE nos promotores de genes sensíveis ao oxigênio. Referências relacionadas: PMID:27531581
• REST pode conferir resistência ao estresse no cérebro envelhecido regulando genes envolvidos na morte celular e respostas ao estresse. Referências relacionadas: PMID:24670762
• No câncer de mama, REST regula negativamente a expressão de SRRM3, e a perda de REST correlaciona-se com aumento da invasividade. Referências relacionadas: PMID:26053433
• Expresso ubiquamente, com níveis mais altos em tecidos linfoides; em neurônios do córtex pré-frontal e hipocampo, o REST nuclear diminui na doença de Alzheimer, demência frontotemporal e doença de Parkinson, frequentemente localizando-se incorretamente para corpos de Lewy. Referências relacionadas: PMID:24670762, PMID:30684677, PMID:21258371, PMID:26053433, PMID:8568247
• REST localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma, contém nove motivos de dedo de zinco do tipo C2H2 e é regulado por fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (resíduos 760–1060) encontra-se na região C‑terminal do REST de comprimento total (isoforma 1). Espera-se que este anticorpo reconheça a isoforma 1; a isoforma 3 mais curta pode não ser detectada. Valide a reatividade no sistema de amostra relevante.
• Para IF/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização. A coloração nuclear deve predominar, mas o sinal citoplasmático pode ser observado em certas condições.
• Escolha modelos celulares apropriados: linhas não neuronais (por exemplo, HEK293, HeLa) expressam REST, enquanto neurônios maduros geralmente mostram baixa ou ausente expressão. Use knockdown por siRNA ou bloqueio por peptídeo para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, a sequência do imunógeno ou o REST recombinante de comprimento total pode servir como padrão ou peptídeo de bloqueio. Considere formatos de ensaio direto e indireto.
• Como um anticorpo policlonal, verifique a consistência de lote para lote ao transitar entre lotes para experimentos críticos.

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