Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-REST/NRSF para WB, ELISA - Q13127

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do REST/NRSF

• Atua como um repressor transcricional que se liga ao elemento silenciador restritivo a neurônios (NRSE) e recruta os corepressores SIN3A e RCOR1, levando ao recrutamento de histona desacetilase e ao silenciamento de genes neuronais em células não neuronais. Referências relacionadas: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093

• Medeia a modificação da cromatina através do complexo BHC, que desacetila e desmetila histonas nos sítios RE1/NRSE para impor o silenciamento gênico.

• Repele a transcrição via recrutamento dependente de CDYL da histona metiltransferase EHMT2, um mecanismo que pode suprimir a transformação celular. Referências relacionadas: PMID:19061646

• A atividade repressora é antagonizada pela heterodimerização com o isoforma 3 alternativamente processado, que impede a ligação ao NRSE e desreprime os genes alvo. Referências relacionadas: PMID:11779185

• Mantém o estado quiescente das células-tronco neurais adultas reprimindo genes neuronais; a dissociação do NRSE após sinais de diferenciação permite a especificação neuronal. Referências relacionadas: PMID:21258371

• Atua como um repressor chave da expressão gênica sob condições hipóxicas e contribui para a resistência ao estresse e regulação da morte celular no cérebro em envelhecimento. Referências relacionadas: PMID:27531581, PMID:24670762

• Expressão tecidual: detectado em neurônios do córtex pré-frontal, hipocampo e cerebelo; os níveis nucleares são reduzidos na doença de Alzheimer e na doença de Parkinson, com agregação patológica em corpos de Lewy em neurônios dopaminérgicos. Referências relacionadas: PMID:24670762, PMID:30684677

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde aos aminoácidos 25–130 do REST humano, uma região N-terminal aos domínios de dedo de zinco. Os usuários devem verificar se seu sistema experimental preserva este epítopo.
• Para Western blot, comece com uma diluição de 1:500–1:2000 e valide usando lisados de linhagens celulares não neuronais que expressam REST (por exemplo, HeLa) juntamente com controles apropriados.
• Para ELISA, proteína REST recombinante ou peptídeo abrangendo a região do imunogênio pode servir como controle positivo para avaliar a ligação do anticorpo.
• Embora seja relatada reatividade cruzada com camundongo e rato, recomenda-se o alinhamento de sequências entre espécies na região do imunogênio para confirmar a reatividade esperada.
• Devido ao alto peso molecular (~122 kDa), garanta que as condições de eletroforese em gel sejam otimizadas para proteínas de alto peso molecular e considere tempos de transferência estendidos no WB.

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