Anticorpo policlonal de coelho anti-RFC1 para WB, IF/ICC e ELISA - P35251

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do RFC1

• RFC1 codifica a subunidade grande (140 kDa) do complexo heteropentamérico do fator de replicação C (RFC), também conhecido como ativador 1.
• O complexo RFC é necessário para o alongamento de moldes de DNA iniciados pelas DNA polimerases delta e épsilon, e carrega o PCNA no DNA de maneira dependente de ATP (PubMed:9488738).
  Referências relacionadas:
  PMID:9488738
• Essa subunidade liga-se especificamente à junção primer-molde e pode interagir tanto com DNA de fita simples quanto com DNA de fita dupla, bem como com sequências ricas em GA, incluindo o elemento de transcrição PO-B, sugerindo funções duplas na replicação do DNA e na regulação da transcrição.
• O RFC1 está localizado no núcleo e é amplamente expresso nos tecidos humanos, exceto na placenta.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica), conforme indicado por estudos proteômicos em larga escala.
• Mutações no RFC1 estão associadas à ataxia cerebelar, neuropatia e síndrome de arreflexia vestibular (CANVAS), ampliando sua relevância clínica para além do metabolismo central do DNA.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcritos, contribuindo para a diversidade funcional.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot, espere uma banda em torno de 128 kDa. Use SDS-PAGE a 6-8% para a separação ideal de proteínas de alto peso molecular.
• Para imunofluorescência/ICC, inclua uma contracoloração nuclear (por exemplo, DAPI) e confirme a localização nuclear. As condições de permeabilização podem precisar de otimização.
• ELISA: o anticorpo pode ser usado para detectar RFC1 recombinante ou endógeno; faça a titulação adequadamente.
• O alinhamento de sequência do imunógeno (aa 400-700) entre humanos, camundongos e ratos indica alta conservação, corroborando a reatividade cruzada relatada; no entanto, valide em sua configuração experimental específica.

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