Anticorpo Policlonal Anti-RFC4 para WB - P35249

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RFC4

• A RFC4 é uma subunidade do complexo do Fator de Replicação C (RFC), também conhecida como subunidade de 37 kDa do Ativador 1 (subunidade A1 de 37 kDa), subunidade 4 do Ativador 1 e RFC37. Trata-se de um fator de replicação de DNA essencial para a estabilidade genômica.
• O complexo RFC atua durante o alongamento de moldes de DNA iniciados pelas DNA polimerases delta e epsilon, facilitando a síntese processiva de DNA.
• A RFC4 é necessária para o carregamento dependente de ATP do antígeno nuclear de células em proliferação (PCNA) no DNA iniciado, uma etapa crítica para a replicação e reparo do DNA.
• A RFC4 provavelmente funciona como um suporte estrutural dentro do complexo RFC, facilitando a montagem das outras subunidades (RFC1, RFC2, RFC3, RFC5).
• Subcelularmente, a RFC4 se localiza no núcleo, o que é consistente com seu papel na replicação do DNA.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, que pode regular sua função ou interações. O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcritos.
• A proteína está associada à atividade de ligação a ATP (ligação a nucleotídeos), fundamental para suas funções dependentes de energia.
• Palavras-chave do UniProt incluem estrutura 3D, acetilação, splicing alternativo, ligação a ATP, surdez, sequenciamento direto de proteínas, replicação de DNA, ligação a nucleotídeos, núcleo, identificação proteômica e proteoma de referência. A surdez pode indicar uma possível associação a doenças.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 204-363 da RFC4 humana, que está dentro da região C-terminal. Espera-se que o anticorpo reconheça a RFC4 de comprimento total e pode ter reatividade cruzada com isoformas que contêm essa região.
• Para Western blotting (WB), antecipe uma banda de aproximadamente 40 kDa. Valide a especificidade usando proteína recombinante ou lisados de células com expressão conhecida de RFC4.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), confirme o padrão de coloração nuclear em células humanas ou de rato. Use marcadores nucleares apropriados para verificar a localização.
• Para imunoprecipitação (IP), considere que a RFC4 faz parte de um complexo multi-subunitário; otimize as condições de lise e lavagem para preservar as interações proteicas se a análise do complexo for desejada.
• A reatividade cruzada é relatada para humano e rato; verifique a reatividade com sua amostra e aplicação específicas.

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