Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-RheB para WB, IF/ICC, ELISA - Q15382

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RheB

• A proteína de ligação a GTP Rheb (homóloga de Ras enriquecida no cérebro), também conhecida como RHEB2, é uma pequena GTPase que atua como ativador alostérico do complexo mTORC1 (PubMed:12172553, PubMed:12271141, PubMed:12842888). Referências relacionadas: PMID:12172553, PMID:12271141, PMID:12842888
• Em resposta a nutrientes, fatores de crescimento ou aminoácidos, Rheb ativa mTOR ao induzir uma mudança conformacional que aumenta a fosforilação dos alvos a jusante RPS6KB1/S6K1 e EIF4EBP1/4E-BP1 (PubMed:29236692, PubMed:33157014). Referências relacionadas: PMID:29236692, PMID:33157014
• Rheb é necessário para a localização lisossomal do complexo TSC-TBC; sob condições de inanição, ele é inativado por TSC-TBC para impedir a ativação de mTORC1 (PubMed:24529379, PubMed:33157014). Referências relacionadas: PMID:24529379, PMID:33157014
• Possui baixa atividade GTPase intrínseca (PubMed:15340059). Referências relacionadas: PMID:15340059
• Subcelularmente, Rheb se localiza no sistema de endomembranas, incluindo membranas do lisossomo, Golgi e RE, além do citosol.
• A expressão tecidual é ubíqua, com os níveis mais altos no músculo esquelético e cardíaco (PubMed:8543055).
• As modificações pós-traducionais incluem prenilação (lipoproteína), metilação, fosforilação e formação de ligação isopeptídica (conjugação Ubl).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 20 kDa; considere usar controles positivos de lisados de células humanas, de camundongo ou de rato, especialmente aqueles com alta expressão de RheB (por exemplo, tecidos musculares).
• Em imunocitoquímica, valide os protocolos de fixação e permeabilização; RheB se localiza em estruturas de endomembranas, resultando em coloração pontilhada.
• Para ELISA, podem ser explorados formatos diretos ou sanduíche; a reatividade cruzada com camundongo e rato oferece flexibilidade no desenvolvimento de ensaios multiespécies.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada; etapas de pré-adsorção podem reduzir a ligação inespecífica, se necessário.

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