Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Rodopsina para WB, IHC-P, ELISA - P08100

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Rodopsina

• A Rodopsina (também conhecida como Opsina-2) é uma proteína fotoreceptora acoplada à proteína G codificada pelo gene RHO em humanos, essencial para a visão em condições de pouca luz.
• Ela funciona ativando a cascata de sinalização da proteína G transducina (Gt) após a absorção de um fóton por seu cromóforo 11-cis-retinal covalentemente ligado, que isomeriza para todo-trans-retinal, induzindo uma mudança conformacional que desencadeia a fototransdução. Referências relacionadas: PMID:6140680 PMID:7846071 PMID:8107847
• Este receptor é necessário para a viabilidade pós-natal das células fotorreceptoras e é crítico para a formação dos segmentos externos dos bastonetes. Referências relacionadas: PMID:12566452 PMID:2215617
• A terminação do sinal ocorre através da fosforilação do receptor, que promove a ligação da arrestina (SAG) e o deslocamento da subunidade alfa da proteína G. Referências relacionadas: PMID:26200343
• A Rodopsina está localizada exclusivamente na membrana dos segmentos externos dos fotorreceptores, onde constitui o principal componente proteico dos discos das células bastonete.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, palmitoilação, fosforilação e glicosilação, e contém uma ligação dissulfeto essencial; ela se liga ao cromóforo retinal e a um íon de zinco.
• É expressa especificamente em células fotorreceptoras em forma de bastonete, que medeiam a visão escotópica (luz fraca).
• Mutações no gene RHO estão associadas a doenças da retina, como retinite pigmentosa e cegueira noturna estacionária congênita.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região do terminal C (aminoácidos 200–348) da Rodopsina humana (NP_000530.1). Esta região é relativamente conservada, o que pode contribuir para a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para Western blot, o peso molecular previsto da Rodopsina humana não modificada é de aproximadamente 39 kDa; no entanto, glicosilação e outras modificações podem causar desvios na banda. Inclua controles positivos apropriados (por exemplo, lisado de tecido retinal) e considere a natureza proteica de membrana do alvo.
• Para imuno-histoquímica (parafina), as condições de recuperação antigênica devem ser otimizadas para secções de retina; o sinal é esperado nos segmentos externos dos fotorreceptores. Recomenda-se bloqueio de peroxidase endógena e fixação adequada do tecido.
• Aplicações de ELISA podem exigir ensaios de competição com peptídeo para confirmar a especificidade; considere revestir com o peptídeo imunogênico ou proteína recombinante.
• Como com qualquer anticorpo policlonal, é possível haver variação de lote para lote; valide novos lotes no sistema de amostra relevante antes do uso em larga escala.

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