Anticorpo Policlonal Coelho Anti-RHOH para WB, IF/ICC, ELISA - Q15669

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RHOH

• RHOH (proteína de ligação a GTP relacionada a Rho RhoH), também conhecido como TTF (proteína de translocação três quatro), pertence à família das GTPases Rho, mas é atípico: liga-se ao GTP, mas carece de atividade GTPase intrínseca e é resistente a RhoGAPs.
• Funciona como um regulador negativo crítico da proliferação, sobrevivência e migração de células progenitoras hematopoiéticas; essencial para o desenvolvimento de timócitos e sinalização do TCR, mediando o recrutamento e ativação do ZAP70.
• Necessário para a fosforilação de CD3Z, translocação de membrana do ZAP70 e ativação do sinalossomo LAT a jusante durante a sinalização do pré-TCR e TCR, garantindo uma seleção beta e positiva eficientes.
• Desempenha papéis fundamentais na função dos mastócitos, facilitando a fosforilação da SYK na transdução de sinal mediada por FcεRI e permitindo a mobilização de cálcio.
• Inibe a ativação de NF-κB e CRK/p38 pelo TNF e regula negativamente a produção de leucotrienos em neutrófilos.
• Localização subcelular: predominantemente citoplasmática e associada à membrana celular.
• Especificidade tecidual: expressão restrita a células hematopoiéticas (mais alta no timo, menor no baço/medula óssea); enriquecida em células T auxiliares TH1; regulada positivamente em neutrófilos sob condições inflamatórias (ex.: fibrose cística, colite).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende o RHOH humano de comprimento total (aminoácidos 1-191), tornando este anticorpo policlonal adequado para detectar múltiplos epítopos; a diluição ótima e as condições devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto é ~21 kDa; use um gel de SDS-PAGE a 12–15% e valide com linhagens celulares hematopoiéticas (ex.: Jurkat, THP-1) conhecidas por expressar RHOH.
• Para imunofluorescência/ICC, a permeabilização é necessária para coloração citoplasmática/de membrana; inclua controles apropriados, dada a expressão restrita a células hematopoiéticas.
• Reatividade cruzada com camundongo é relatada; este anticorpo pode ser usado em modelos de camundongo, mas a validação na espécie e tecido relevantes é recomendada.
• Aplicações de ELISA podem ser exploradas usando proteína recombinante como padrão; considere otimizar as condições de revestimento e detecção.

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