Anticorpo Monoclonal Anti-Rig-I/DDX58 para WB, ELISA - O95786

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Rig-I/DDX58

• RIG-I (gene induzido por ácido retinoico I), também conhecido como DDX58, é uma helicase de RNA dependente de ATP pertencente à família de sensores imunes inatos do receptor tipo RIG-I (RLR).
• Funciona como um receptor imune inato citoplasmático que detecta ácidos nucleicos virais e desencadeia cascatas de sinalização que levam à produção de interferon tipo I e citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:16125763
• Reconhece ssRNA e dsRNA 5'-trifosforilados, com um requisito crítico para emparelhamento de bases de extremidade romba na extremidade 5'; dsRNAs curtos (<1 kb) são ligantes eficazes. Referências relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:19576794
• Após a ligação do ligante, o RIG-I homooligomeriza e recruta a ligase E3 RNF135, levando à associação com MAVS, ativação de TBK1/IKBKE e fosforilação de IRF3/IRF7 para induzir genes antivirais. Referências relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:28469175, PMID:31006531
• Detecta uma ampla gama de vírus de RNA de fita positiva e negativa, incluindo influenza, hepatite C, dengue e vírus sincicial respiratório, bem como rotavírus e reovírus. Referências relacionadas: PMID:21616437, PMID:21884169
• Também medeia respostas antivirais a vírus dsDNA, como o vírus Epstein-Barr, reconhecendo intermediários de dsRNA transcritos pela RNA polimerase III. Referências relacionadas: PMID:19631370
• Localiza-se no citoplasma, citoesqueleto, projeções celulares (membranas de rufos) e junções apertadas; expresso em células do músculo liso vascular.
• Sofre acetilação e fosforilação; abriga domínios de dedo de zinco e helicase; participa de interações hospedeiro-vírus através de ubiquitinação e formação de ligação isopeptídica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 107 kDa. Considere usar controles positivos, como linhagens de células humanas infectadas viralmente (por exemplo, A549 estimulada com poly(I:C) ou infectada com vírus Sendai) para verificar a indução de RIG-I, pois a expressão basal pode ser baixa em células não estimuladas.
• Como o imunógeno é um peptídeo sintético, espera-se que o anticorpo reconheça um epítopo linear. Valide a detecção de RIG-I endógeno em seu sistema de amostra e otimize as condições de bloqueio e lavagem para reduzir a ligação inespecífica.
• No ELISA, o anticorpo pode ser empregado como um reagente de captura ou detecção. Para ensaios quantitativos, recomenda-se o pareamento com um anticorpo de detecção correspondente.
• Armazene conforme recomendado em bolsa de gelo no recebimento e mantenha a -20°C ou -80°C para armazenamento de longo prazo; minimize os ciclos de congelamento-descongelamento.
• Este anticorpo é produzido contra RIG-I humano e validado para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada e deve ser verificada se usado em modelos não humanos.

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