Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-Rig-I/DDX58 para WB e ELISA - O95786

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Rig-I/DDX58

• RIG-I (DDX58) é uma RNA helicase dependente de ATP e um receptor imunológico inato chave que detecta ácidos nucleicos virais citoplasmáticos, desencadeando a produção de interferon tipo I e citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:16125763
• A proteína reconhece RNA de fita dupla com 5'-trifosfato (dsRNA) e dsRNAs curtos, sendo que o pareamento de bases na extremidade romba do 5' é essencial para a ativação, enquanto as extremidades salientes modulam a sinalização. Referências relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:19576794
• Após a ligação ao ligante, RIG-I se oligomeriza em filamentos e recruta a ubiquitina ligase E3 RNF135, levando à associação com MAVS/IPS1 e ativação a jusante dos fatores de transcrição TBK1, IKBKE e IRF3/7. Referências relacionadas: PMID:28469175, PMID:31006531
• Ele detecta um amplo espectro de vírus de RNA, incluindo paramixovírus, rabdovírus, ortomixovírus, flavivírus, rotavírus e reovírus, e também detecta vírus de DNA de fita dupla como o vírus Epstein-Barr através de transcritos da RNA polimerase III. Referências relacionadas: PMID:21616437, PMID:21884169, PMID:19631370
• A localização subcelular inclui citoplasma, membrana de pregas, citoesqueleto e junções apertadas, o que é consistente com seu papel na vigilância viral intracelular.
• Modificações pós-traducionais como acetilação, fosforilação e ubiquitinação regulam sua atividade, e ele está sujeito ao splicing alternativo.
• Especificidade tecidual: Presente em células do músculo liso vascular (em nível de proteína).
• Funções adicionais podem incluir produção de granulócitos, fagocitose bacteriana e regulação da migração celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, considere usar lisados de células totais de células humanas ou de rato estimuladas com mímicos virais (ex.: poli(I:C)) para aumentar a expressão de RIG-I; valide a especificidade com controles de silenciamento por siRNA ou knockout.
• A natureza policlonica pode detectar múltiplas bandas; a banda principal é esperada em ~107 kDa. Confira o peso molecular usando marcadores apropriados.
• Em ELISA, o peptídeo do imunógeno (aa 825-925) pode servir como controle positivo para a ligação do anticorpo; titule o anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído.
• A reatividade cruzada com rato é confirmada; para outras espécies, valide no sistema de amostra relevante antes do uso.

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