Anticorpo Monoclonal Anti-RING1B/RNF2 para WB, IP e ELISA - Q99496

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RING1B/RNF2

• RING1B/RNF2, também conhecido como RING2, RING1b ou BAP-1, é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 que catalisa a monoubiquitinação da histona H2A na Lis-119 (H2AK119Ub), uma modificação chave para a repressão transcricional epigenética e inativação do cromossomo X. Referências relacionadas: PMID:15386022 PMID:16359901 PMID:21772249
• É um componente essencial do complexo repressor Polycomb 1 (PRC1), que mantém o estado silenciado de genes de desenvolvimento, incluindo clusters Hox, por meio da modificação da cromatina. Referências relacionadas: PMID:16359901 PMID:26151332
• A atividade da ligase E3 do RING1B/RNF2 é aumentada pela subunidade BMI1/PCGF4 do PRC1. Referências relacionadas: PMID:21772249
• O RNF2 localiza-se predominantemente no núcleo, mas também pode ser encontrado no citoplasma e associado a cromossomos, refletindo seu papel dinâmico na regulação da cromatina.
• A proteína contém um domínio de dedo de zinco do tipo RING e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem modular sua função.
• O RING1B/RNF2 tem sido implicado na associação cromossômica dependente do ciclo celular e é negativamente regulado pela AURKB em linfócitos em repouso para manter a transcrição.
• Além disso, atua como um regulador negativo da autofagia ao ubiquitinar a AMBRA1, direcionando-a para degradação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético dentro dos aminoácidos 100–200 do RING1B/RNF2 humano; esta região é prevista como superficialmente acessível com base em modelos estruturais e deve gerar anticorpos que reconheçam conformações proteicas nativas em imunoprecipitação (IP) e ELISA.
• Para western blotting (WB), o peso molecular previsto é ~38 kDa; considere usar marcadores de escada de proteína apropriados e verificar a especificidade da banda em lisados celulares relevantes de humanos, camundongos e ratos.
• Em experimentos de IP, pré-limpar os lisados e otimizar as proporções de anticorpo para proteína pode ajudar a minimizar o fundo; a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato permite estudos comparativos.
• Para ELISA, faça a titulação do anticorpo usando proteína recombinante ou padrões de peptídeo para determinar as concentrações de trabalho ideais; observe que este anticorpo é monoclonal e pode exibir alta especificidade.

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