Anticorpo Policlonais Anti-RIP3/RIPK3 para IHC-P e ELISA - Q9Y572

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RIP3

• RIP3 (Proteína quinase 3 de serina/treonina que interage com receptor), também conhecida como RIPK3, é uma serina/treonina quinase que ativa tanto a necroptose quanto a apoptose, duas vias paralelas de morte celular programada. Referências relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• Após ativação pela ZBP1, a RIPK3 forma um complexo indutor de necrose e fosforila a MLKL, levando à permeabilização da membrana plasmática e morte celular por necroptose. Referências relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• A RIPK3 também regula a apoptose extrínseca por meio de um mecanismo dependente de RIPK1, FADD e CASP8, independente da MLKL e da atividade quinásica própria.
• A proteína se localiza predominantemente no citosol, mas também pode ser encontrada no núcleo, onde medeia a necroptose nuclear em resposta a infecções virais como os ortomixovírus.
• A RIPK3 é altamente expressa no pâncreas e detectada em níveis mais baixos no coração, placenta, pulmão e rim; sua expressão aumenta significativamente em cânceres de cólon e pulmão.
• Em certos tipos de células, a RIPK3 restringe a replicação viral por meio de vias independentes de morte, por exemplo, ao upregular a síntese de ACOD1/IRG1 e de itaconato após infecção pelo vírus Zika.
• A RIPK3 se liga e aumenta a atividade das enzimas metabólicas GLUL, GLUD1 e PYGL, potencialmente estimulando o ciclo do ácido tricarboxílico, fosforilação oxidativa e produção de ERO. Referências relacionadas: PMID:19498109
• A quinase sofre fosforilação, ubiquitinação e formação de ligação isopeptídica, e está sujeita a splicing alternativo, contribuindo para a diversidade funcional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal é desenvolvido contra um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 410-518 (região C-terminal) da RIP3 humana. Espera-se que ele reconheça a RIP3 de comprimento total e também possa detectar variantes de splicing que contêm esse epitopo.
• Para IHC-P, considere otimizar as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampões de citrato ou EDTA mediados por calor) e valide a especificidade da coloração usando controles de tecido apropriados (positivos e negativos) e, se possível, pré-absorção com o peptídeo imunógeno.
• Em ELISA, certifique-se de que o antígeno de revestimento corresponde à região do imunógeno ou use proteína recombinante de comprimento total. Verifique a consistência entre lotes titulando o anticorpo contra um padrão conhecido.
• Como reagente policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua referência interna ao comparar resultados entre experimentos.

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