Anticorpo Monoclonal Anti-RIPK1/RIP para WB, IP, ELISA - Q13546

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RIPK1

• RIPK1, também conhecida como RIP1 ou proteína de morte celular RIP, é uma serina-treonina quinase que atua como um regulador crítico da apoptose mediada por TNF, necroptose e sinalização inflamatória (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Referências relacionadas: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280
• Exibe funções dependentes da atividade quinase na morte celular e funções de andaime independentes de quinase na sobrevivência celular, incluindo a ativação da via canônica NF-kappa-B (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Referências relacionadas: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513
• RIPK1 regula a montagem de dois complexos indutores de morte: complexo IIa (RIPK1-FADD-CASP8) para apoptose e complexo IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) para necroptose.
• Inibe a necroptose dependente de RIPK3 recrutando CASP8 via FADD, que cliva a RIPK1, limitando assim a necroptose induzida por TNF (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Referências relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:29440439
• RIPK1 está predominantemente localizada no citoplasma e na membrana celular, consistente com seu papel na transdução de sinal do TNFR1.
• Modificações pós-traducionais chave incluem fosforilação, ubiquitinação (ligação isopeptídica) e clivagem proteolítica pela CASP8, regulando suas funções pró-morte e pró-sobrevivência.
• Também promove a transcrição de citocinas pró-inflamatórias como a IL-6, ligando a morte celular a respostas imunes (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Referências relacionadas: PMID:31827280, PMID:31827281

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 289-490 da RIPK1 humana, uma região que abrange parte do domínio quinase; este desenho pode favorecer a detecção tanto da forma de comprimento total quanto de fragmentos contendo a quinase.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 76 kDa. Considere incluir controles apropriados para contabilizar produtos de clivagem que podem surgir durante a apoptose ou necroptose.
• Na imunoprecipitação, valide o desempenho do anticorpo com interatores conhecidos da RIPK1, como TRADD ou FADD, sob condições de estimulação apropriadas (por exemplo, tratamento com TNF).
• Experimentos de ELISA podem ser otimizados para quantificação de RIPK1 em lisados celulares ou homogenatos de tecido; a reatividade cruzada com outros membros da família RIP deve ser avaliada.

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