Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-RIPK1/RIP (Validado por KO) para WB, IP, ELISA - Q13546

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RIPK1

• RIPK1 (também conhecido como RIP, RIP1, proteína de morte celular RIP) é uma serina-treonina quinase codificada pelo gene RIPK1 em humanos. O splicing alternativo produz isoformas com pesos moleculares de aproximadamente 76 e 71 kDa.
• Como regulador chave da sinalização do fator de necrose tumoral (TNF), o RIPK1 controla a apoptose, a necroptose e as vias inflamatórias (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Referências relacionadas: PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• O RIPK1 tem funções duplas: atua como um andaime independente de quinase no complexo I do TNF-R1 para promover a ativação de NF-κB e a sobrevivência celular, enquanto sua atividade de quinase é necessária para impulsionar os complexos pró-morte IIa (apoptose) e IIb (necroptose) (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Referências relacionadas: PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• Na necroptose, o RIPK1 atua como um inibidor da necroptose mediada por RIPK3 ao facilitar o recrutamento e ativação dependente de FADD da caspase‑8, que cliva o RIPK1 (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Referências relacionadas: PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:29440439
• O RIPK1 também contribui para a inflamação ao promover a produção transcricional de citocinas pró-inflamatórias, como a interleucina‑6 (IL6) (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Referências relacionadas: PMID:31827280 PMID:31827281
• A quinase fosforila alvos a jusante, incluindo RIPK3 (PubMed:19524513) e o ativador da via MAP3K5 DAB2IP em Ser‑728 (PubMed:15310755, PubMed:17389591). Referências relacionadas: PMID:19524513 PMID:15310755 PMID:17389591
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática, com associação adicional na membrana celular.
• As modificações pós-traducionais do RIPK1 incluem fosforilação, ubiquitinação e glicosilação; mutações no gene RIPK1 estão ligadas a doenças autoinflamatórias.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange a região terminal C (aminoácidos 465–671) do RIPK1 humano; esta região situa-se a jusante do domínio da quinase e pode reconhecer ambas as isoformas relatadas.
• Para Western blot (WB), o RIPK1 endógeno tipicamente migra como um duplete em torno de 76 e 71 kDa; devido a modificações pós-traducionais e formação de complexos, bandas adicionais podem aparecer.
• A validação por KO confirma a especificidade do anticorpo; recomenda-se incluir lisados de células com knockout de RIPK1 como controle negativo.
• Para imunoprecipitação (IP) e ELISA, as concentrações ideais de anticorpo devem ser determinadas empiricamente no sistema experimental relevante.

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