Anticorpo Policlonal Anti-RIPK2 para WB, ELISA - O43353

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RIPK2

• A RIPK2 (proteína-quinase 2 de serina/treonina que interage com o receptor), também conhecida como RICK, RIP2, CARDIAK e CARD3, é uma quinase de dupla especificidade essencial para a transdução de sinais imunológicos inatos e adaptativos. Referências relacionadas: PMID:14638696 PMID:17054981 PMID:21123652
• Após o reconhecimento do peptidoglicano bacteriano, NOD1 e NOD2 recrutam a RIPK2 por meio de interações homotípicas CARD-CARD, desencadeando a formação de filamentos de RIPK2 que funcionam como plataformas de sinalização. Referências relacionadas: PMID:17054981 PMID:17562858 PMID:21123652
• A RIPK2 recrutada sofre poliubiquitinação ligada a K63 por XIAP/BIRC2/BIRC3 e ubiquitinação linear ligada a M1 pelo complexo LUBAC, convertendo-se em uma plataforma para os efetores a jusante. Referências relacionadas: PMID:22607974 PMID:28545134 PMID:29452636
• Essas cadeias de poliubiquitina recrutam o adaptador IKBKG/NEMO e o complexo TAB2/TAB3-TAK1, levando à fosforilação de IKK e à subsequente translocação nuclear de NF-κB e ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:17562858 PMID:22607974 PMID:29452636 PMID:18079694
• A atividade quinase da RIPK2 é dispensável para a sinalização de NOD1/NOD2; sua função principal é atuar como uma proteína de suporte estrutural. Referências relacionadas: PMID:29452636 PMID:30026309
• A RIPK2 localiza-se no citoplasma, na membrana celular e no retículo endoplasmático, e é amplamente expressa em tecidos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, leucócitos, baço e rim.
• Na imunidade adaptativa, a RIPK2 participa da sinalização do receptor de células T, promovendo a fosforilação de BCL10 e a ativação de NF-κB. Referências relacionadas: PMID:14638696
• A RIPK2 também medeia a fosforilação de tirosina dependente de Src de ARHGEF2 na sinalização de NOD2 e regula a inativação de RHOA a jusante de NGFR. Referências relacionadas: PMID:21887730 PMID:26646181

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a proteína RIPK2 de comprimento total (aa 1–540), o que pode resultar no reconhecimento de múltiplas isoformas ou formas modificadas pós-traducionalmente; confirme a banda de interesse (prevista em aproximadamente 61 kDa) utilizando controles apropriados.
• Para Western blotting, valide a diluição ideal do anticorpo para sua amostra e sistema de detecção específicos; os níveis de expressão endógena de RIPK2 podem variar entre diferentes tipos celulares e tecidos.
• Devido à natureza policlonal, é possível esperar reatividade cruzada; verifique a especificidade utilizando amostras com knockout ou knockdown de RIPK2 ou por bloqueio com peptídeo.
• Em aplicações de ELISA, faça uma titulação do anticorpo contra o imunógeno recombinante ou o alvo nativo para determinar a faixa de detecção linear.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com a RIPK2 de camundongo e rato, mas recomenda-se o alinhamento de sequências ao estender seu uso para outras espécies.

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