Anticorpo Monoclonal Anti-RIPK3 (RIP3) para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y572

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RIPK3 (Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3)

• A Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3 (RIPK3), também conhecida como RIP3, é um mediador chave da necrose programada (necroptose) e da apoptose, atuando a jusante de receptores de morte e sensores patogénicos. Referências relacionadas: PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:22265413
• Após ativação pela sinalização do ZBP1 ou do recetor de TNF, a RIPK3 forma um complexo indutor de necrose e fosforila a MLKL, desencadeando a sua translocação para a membrana plasmática, influxo de cálcio e rutura da membrana. Referências relacionadas: PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:22265413
• A RIPK3 também regula a apoptose através de uma via dependente de RIPK1, FADD e CASP8, que é independente da MLKL e da sua própria atividade quinase.
• A proteína encontra-se no citosol e pode translocar-se para o núcleo, onde medeia a necroptose em resposta a infeções virais, perturbando o envelope nuclear.
• A RIPK3 liga-se e aumenta a atividade das enzimas metabólicas GLUL, GLUD1 e PYGL, potencialmente estimulando o ciclo de Krebs e a fosforilação oxidativa para aumentar a produção de ROS. Referências relacionadas: PMID:19498109
• Altamente expressa no pâncreas, com expressão mais baixa no coração, placenta, pulmão e rim; a expressão está significativamente elevada em cancros do cólon e do pulmão.
• Durante a infeção pelo vírus do herpes simplex 1, a RIPK3 forma estruturas amiloides heteroméricas com a proteína viral ICP6, inibindo a necroptose e facilitando a evasão imune.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (auto- e trans-fosforilação com RIPK1), formação de ligações isopeptídicas e conjugação semelhante à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um péptido sintético que abrange os aminoácidos 101–200 da RIPK3 humana (NP_006862.2). Esta região é conservada entre humanos, camundongos e ratos, consistente com a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 57 kDa; no entanto, bandas adicionais podem aparecer devido a modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação) ou splicing alternativo. Valide a especificidade da banda usando controlos apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), podem ser necessários métodos de recuperação de antigénio. Tecidos de controlo positivo incluem amostras de pâncreas ou tumores de cólon/pulmão onde a RIPK3 é altamente expressa.
• Em aplicações de ELISA, confirme a reatividade com a proteína alvo nas suas condições específicas de ensaio; considere o uso de proteína RIPK3 recombinante ou lisados celulares como padrões.

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