Anticorpo policlonal de coelho anti-RNF149 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8NC42

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RNF149

• Identidade Proteica e Apelidos: E3 ubiquitin-protein ligase RNF149, também designada como proteína 2 transativada pela polimerase de DNA (DNAPTP2) e proteína RING finger 149.
• Função Principal: Atua como uma E3 ubiquitin-protein ligase que medeia a ubiquitinação de BRAF, direcionando-a para degradação proteassômica.
• Domínio Proteico e Classificação: Contém um domínio dedo de zinco tipo RING, classificando-a como uma transferase de ubiquitina E3 do tipo RING envolvida na via de conjugação de ubiquitina.
• Localização Subcelular: Predita como uma proteína de membrana, possuindo um peptídeo sinal e uma hélice transmembrana que a ancla nas membranas celulares.
• Modificações Pós-traducionais: Identificada como glicoproteína e fosfoproteína; a ligação do íon de zinco é essencial para sua estrutura de dedo RING e atividade catalítica.
• Peso Molecular: A massa molecular prevista é de aproximadamente 43 kDa (UniProt: 43.165 Da), em concordância com o peso da proteína observado.
• Identificação Proteômica: Detectada em nível proteico por meio de análises proteômicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 221–400) provavelmente corresponde a uma região citoplasmática; avalie se o epítopo está acessível no preparo da sua amostra (por exemplo, condições desnaturantes versus nativas para WB/IHC).
• Para Western blot, espere uma banda próxima a 43 kDa. Utilize lisados de controle positivo adequados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato.
• Na imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), realize a recuperação de antígeno conforme a necessidade e inclua controles negativos (por exemplo, bloqueio com peptídeo ou células knockout) para confirmar a especificidade.
• Por se tratar de um anticorpo policlonal de coelho, pode ocorrer variabilidade entre lotes. Faça a titulação do anticorpo para cada aplicação e valide no seu sistema experimental.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detecção; considere emparelhá-lo com um anticorpo de captura monoclonal validado se estiver desenvolvendo um ensaio sanduíche.

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