Anti-RNF20 Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB e ELISA - Q5VTR2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RNF20 (BRE1A)

• O RNF20 (também conhecido como BRE1A) é uma proteína com dedo RING que funciona como a subunidade catalítica do complexo de ligase E3 de ubiquitina-proteína RNF20/40, mediando especificamente a monoubiquitinação da histona H2B na lisina 120 (H2BK120ub1).
• O H2BK120ub1 serve como uma marca epigenética que é pré-requisito para a metilação da histona H3 Lys-4 e Lys-79 (H3K4me e H3K79me), desempenhando um papel central no código de histonas e na regulação gênica.
• O complexo RNF20/40 coopera com as enzimas E2 UBE2A ou UBE2B para formar a ligase de ubiquitina da histona H2B e é necessário para a ativação transcricional dos genes Hox.
• O RNF20 atua como um coativador transcricional ao ser recrutado para o promotor do MDM2, provavelmente pelo p53/TP53, e também medeia a poliubiquitinação da isoforma 2 da PA2G4 em células cancerígenas, levando à sua degradação proteassomal.
• A proteína localiza-se exclusivamente no núcleo, consistente com suas funções de regulação da cromatina.
• O RNF20 é expresso em tecido cerebral normal e gliomas malignos em nível de proteína, e está sujeito a acetilação e fosforilação como modificações pós-traducionais.
• A proteína contém um domínio de hélice superenrolada (coiled-coil) e um motivo dedo de zinco, permitindo a ligação de metais e a atividade típica de transferase de ubiquitina do tipo RING.
• Durante a infecção microbiana, o RNF20 promove o ciclo lítico do herpesvírus humano 8 (KSHV) induzindo a expressão de genes virais líticos, incluindo o gene de comutação de latência RTA/ORF504.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise de Western blot, considere enriquecer frações nucleares devido à localização nuclear do RNF20 para aumentar a sensibilidade de detecção.
• Valide a especificidade do anticorpo usando controles de knockdown ou knockout na linhagem celular ou sistema de tecido relevante.
• O imunógeno de peptídeo sintético (aa 1-100 do RNF20 humano) pode ser usado como um controle positivo em ensaios de ELISA para confirmar a reatividade do anticorpo.
• Dada a reatividade cruzada com humano e camundongo, o anticorpo pode ser adequado para estudos em modelos de camundongo, mas a titulação e validação no tipo específico de amostra são recomendadas.
• Como o RNF20 sofre fosforilação e acetilação, bandas adicionais podem aparecer em certas condições; tratamentos com fosfatase ou desacetilase podem ajudar a confirmar a identidade da banda.

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