Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RNF34 para WB, IF/ICC e ELISA - Q969K3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RNF34

• A RNF34 é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 que catalisa a degradação proteossomal mediada por ubiquitina de proteínas alvo, incluindo CASP8 e CASP10, regulando negativamente a apoptose extrínseca. Referências relacionadas: PMID:15069192
• Ubiquitina diretamente a p53/TP53, direcionando-a para degradação proteossomal e, assim, regulando negativamente as funções celulares dependentes de p53. Referências relacionadas: PMID:17121812
• A RNF34 regula indiretamente a p53/TP53 ao medir a ubiquitinação e degradação da SFN (14-3-3 sigma), um estabilizador da p53. Referências relacionadas: PMID:18382127
• Mede a degradação proteossomal da PPARGC1A (PGC-1α), influenciando o metabolismo das células adiposas castanhas e a homeostase energética. Referências relacionadas: PMID:22064484
• Através da poliubiquitinação ligada à Lys-48 da NOD1, a RNF34 promove a sua degradação proteossomal, sugerindo um papel na regulação da imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:25012219
• A proteína localiza-se na membrana celular, sistema de membranas internas, núcleo (incluindo speckles nucleares) e citosol.
• A RNF34 é expressa ubiquitousamente em tecidos como coração, cérebro, fígado, músculo esquelético, rim, pâncreas, baço, timo, próstata, testículo, ovário, cólon e leucócitos.
• As características estruturais incluem um dedo de zinco do tipo RING; a proteína está sujeita a splicing alternativo e fosforilação, consistente com o seu papel nas vias de apoptose e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 1-220 terminais N da RNF34 humana. Esta região pode ser suficiente para detetar a RNF34 de comprimento total; no entanto, a RNF34 endógena pode exibir múltiplos isoformas devido ao splicing alternativo. Considere validar a especificidade do anticorpo nas suas linhas celulares alvo usando controlos apropriados.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto da RNF34 é de aproximadamente 42 kDa. Pode esperar-se uma banda próximo deste tamanho, mas modificações pós-traducionais ou variabilidade de isoformas podem levar a ligeiros desvios. Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para as suas amostras.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), a RNF34 foi relatada como localizada no núcleo (incluindo speckles nucleares), citosol e membrana celular. Devem ser testadas condições adequadas de fixação e permeabilização para preservar a antigenicidade e alcançar coloração específica.
• Para ELISA, a natureza policlonal do anticorpo pode fornecer alta sensibilidade para detetar a RNF34 em amostras humanas. Inclua curvas padrão e controlos negativos para garantir a linearidade e especificidade do ensaio.
• Este anticorpo foi validado para reatividade cruzada humana. Se o utilizar para outras espécies, recomenda-se a análise de homologia de sequência e testes empíricos.

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