Anticorpo policlonal de coelho anti-RNF4 para WB, ELISA - P78317

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de RNF4

• RNF4 (SLX5, SNURF) é uma E3 ubiquitina-proteína ligase que se liga especificamente a cadeias polissumoi­ladas e medeia a poliubiquitinação (ligações Lys-6, Lys-11, Lys-48, Lys-63), direcionando os substratos para degradação proteassômica.
  Referências relacionadas: PMID:18408734, PMID:19307308, PMID:35013556

• Regula a degradação de proteínas celulares importantes, incluindo PML, o ativador transcricional PEA3 e PARP1 sumoilada, desempenhando funções tanto no controle transcricional quanto na resposta a danos no DNA.
  Referências relacionadas: PMID:18408734, PMID:19307308, PMID:20943951, PMID:35013556

• RNF4 é essencial para o alinhamento dos cromossomos e a montagem do fuso durante a mitose, ao direcionar o CENPI polissumoi­l­ado no complexo cinetocórico CENPH-CENPI-CENPK para degradação.
  Referências relacionadas: PMID:20212317

• Modula as respostas celulares à hipóxia e ao choque térmico, mediando a degradação de EPAS1/HIF-2α e PARP1, respectivamente.
  Referências relacionadas: PMID:19779455, PMID:20026589

• Alternativamente, RNF4 pode se ligar ao DNA/nucleossomos e aumentar a transcrição basal e mediada por receptores de esteroides, indicando uma função reguladora transcricional direta.
  Referências relacionadas: PMID:12885770

• A proteína contém um domínio RING finger e vários motivos de dedos de zinco, compatíveis com suas atividades de ligação ao DNA e de E3 ligase (Palavras-chave: ligação ao DNA, ligação a metais, zinco, dedo de zinco).

• Subcelularmente, RNF4 está localizada no citoplasma, no núcleo e nos corpos nucleares de PML, refletindo seu envolvimento em processos nucleares e citoplasmáticos.

• É amplamente expressa em baixos níveis em muitos tecidos, com alta expressão nos testículos, sugerindo uma função especializada no desenvolvimento das células germinativas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é composto pelos aminoácidos 1-190 de RNF4 humano, abrangendo a região N-terminal, que inclui vários motivos de dedos de zinco e o domínio RING. Esse desenho pode gerar anticorpos capazes de reconhecer tanto a proteína de comprimento completo quanto fragmentos N-terminais.
• Na transferência Western, espera-se uma banda em torno de 21 kDa para RNF4 não modificada. Devido às extensas modificações pós-traducionais (sumoilação, ubiquitinação), podem ser observadas bandas adicionais. Valide em amostras com altos níveis endógenos de RNF4, como tecido testicular.
• Em aplicações de ELISA, considere a imobilização do imunógeno recombinante ou de substratos sumoilados para comprovar a especificidade; as condições do ELISA indireto devem ser determinadas empiricamente.
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo e rato; verifique a homologia da sequência na região do imunógeno, pois a sequência N-terminal é altamente conservada entre essas espécies.

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