Anticorpo Policlonal Anti-RNF8 para WB, ELISA - O76064

E>Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RNF8

• O RNF8 é uma ligase de ubiquitina-proteína E3 que desempenha um papel central na sinalização de danos ao DNA, mediando a ubiquitinação ligada ao 'Lis-63' das histonas H2A e H2AX nas quebras de fita dupla (DSBs), promovendo assim o recrutamento de proteínas de reparo do DNA, como TP53BP1 e BRCA1 (PubMed:18001824, 18006705). Referências relacionadas: PMID:18001824, PMID:18006705
• Também catalisa cadeias de poliubiquitina ligadas ao 'Lis-48', visando substratos como JMJD2A/KDM4A para degradação, o que desmascara as marcas H4K20me2 e facilita o recrutamento de TP53BP1 nos locais de dano ao DNA (PubMed:11322894, 14981089, 17724460). Referências relacionadas: PMID:11322894, PMID:14981089, PMID:17724460
• O RNF8 contribui para o reparo de ligações cruzadas entre fitas e ativação da via da anemia de Fanconi por meio da ubiquitinação de H2A/H2AX, e promove a união de extremidades não homólogas degradando KU80/XRCC5.
• Está envolvido na descompactação de cromatina de ordem superior e regula modificações de histonas, incluindo a ubiquitinação de H2B e a acetilação de H4K16, para facilitar a ativação da quinase ATM.
• A localização subcelular inclui o núcleo, citoplasma, corpo central e telômeros, consistente com seus papéis no reparo do DNA, mitose e manutenção telomérica.
• Expresso de forma onipresente, com os níveis mais altos no cérebro adulto e testículos, e desempenha um papel crítico na espermatogênese mediando a substituição de histonas.
• Funções adicionais incluem a recombinação de troca de classe imune (PubMed:22865450) e regulação potencial da atividade transcricional do RXRA. Referências relacionadas: PMID:22865450

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting, lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato são apropriados; o peso molecular previsto é de aproximadamente 56 kDa, mas modificações pós-traducionais podem resultar em bandas adicionais.
• O anticorpo é adequado para ELISA; considere usar o imunógeno recombinante (aminoácidos 230-485) como controle positivo.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada; valide o desempenho no contexto experimental específico.
• Para aumentar a detecção da atividade do RNF8 relacionada a danos ao DNA, considere induzir DSBs com radiação ionizante ou agentes químicos antes do preparo da amostra.

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