Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ROBO1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6N7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ROBO1

• ROBO1 (homólogo 1 Roundabout), também conhecido como DUTT1 (Deleted in U Twenty Twenty) ou H-Robo-1, é um receptor para as pistas de orientação SLIT1 e SLIT2.
• Medeia a navegação axonal na linha média ventral do tubo neural e a projeção de axônios durante o desenvolvimento neuronal. Referências relacionadas: PMID:1010222268, PMID:24560577
• A interação com o domínio intracelular de FLRT3 medeia a atração de axônios em direção a células que expressam NTN1. Referências relacionadas: PMID:24560577
• A proteína é localizada na membrana celular, projeções de axônios e na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi.
• É amplamente expressa nos tecidos, com exceção do rim.
• ROBO1 regula a migração celular interagindo com MYO9B, levando ao aumento dos níveis de RHOA ativo ligado a GTP. Referências relacionadas: PMID:26529257
• A proteína contém domínios de imunoglobulina, repetições do tipo III de fibronectina e um domínio transmembrana, e está sujeita a glicosilação, fosforilação e ubiquitinação.
• Issoformas com splicing alternativo e variantes associadas a doenças (por exemplo, CPHD8, nanismo, deficiência intelectual) destacam sua importância no desenvolvimento e na doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, antecipe uma banda em torno de 181 kDa; inclua marcadores de peso molecular e valide com um controle positivo conhecido (por exemplo, lisado de cérebro de camundongo ou HEK293).
• O imunógeno abrange os aminoácidos 1452–1651 na região C-terminal; confirme a especificidade pré-incubando o anticorpo com o peptídeo imunógeno em experimentos de bloqueio.
• Para IF/ICC, use linhagens celulares apropriadas que expressam ROBO1 (por exemplo, culturas de neurônios corticais ou neuroblastoma) e realize etapas de permeabilização; a coloração simultânea com marcadores axonais pode ajudar a verificar a localização.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo e rato, este anticorpo pode ser adequado para modelos roedores de neurodesenvolvimento; realize a titulação inicial na espécie pretendida.
• Em ELISA, considere o uso de fragmentos do domínio extracelular recombinante do ROBO1 como reagentes de captura e valide com ensaios de competição de ligação SLIT1/2.

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