Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-RPA70/RPA1 para WB, IP, ELISA, ChIP - P27694

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RPA70/RPA1

• A subunidade RPA70, codificada pelo RPA1 (também conhecido como REPA1), é o componente de ligação ao DNA de 70 kDa do complexo heterotrímero de proteína de replicação A (RPA), que também inclui as subunidades RPA2 e RPA3. Juntos, eles ligam e estabilizam intermediários de DNA de fita simples (ssDNA).
• O RPA é indispensável para a replicação do DNA cromossômico e orquestra a resposta celular ao dano no DNA. Ele ativa pontos de verificação de danos no DNA e facilita a escolha da via de reparo. Referências relacionadas: PMID:9430682
• Através do recrutamento de ATRIP, o RPA ativa a quinase ATR, um regulador mestre da resposta a danos no DNA, ligando a detecção de ssDNA à sinalização global de pontos de verificação. Referências relacionadas: PMID:24332808
• O RPA é necessário para o recrutamento dos fatores de recombinação homóloga RAD51 e RAD52 para a cromatina nos locais de quebras de fita dupla do DNA. Referências relacionadas: PMID:17765923
• No reparo por excisão de nucleotídeos (NER), o RPA recruta diretamente XPA e XPG para locais danificados e é essencial para a etapa de dupla incisão/excisão desta via de reparo. Referências relacionadas: PMID:7697716
• O RPA contribui para a manutenção dos telômeros, preservando a integridade genômica, e mutações no RPA1 estão ligadas a distúrbios da biologia telomérica. Referências relacionadas: PMID:17959650 | PMID:34767620
• Um complexo RPA alternativo, aRPA, é formado quando RPA4 substitui RPA2. Este complexo retém a capacidade de ligação ao ssDNA, mas funciona principalmente no reparo do DNA em vez da replicação do DNA cromossômico. Referências relacionadas: PMID:19996105
• O RPA estimula a atividade de helicase 5'-3' de BRIP1/FANCJ, ligando-a ao reparo de crosslinks interfitas e mantendo a estabilidade do garfo de replicação. Referências relacionadas: PMID:17596542
• O RPA70 é predominantemente nuclear e localiza-se nos corpos PML. Ele está sujeito a extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade e interações proteicas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dentro da região N-terminal (aminoácidos 1–100). Para Western blotting, o peso molecular esperado é de aproximadamente 68 kDa; lisados de células inteiras de células cultivadas humanas ou de ratos são materiais de partida adequados.
• Para ensaios de ChIP, note que o epítopo reside em uma região não estruturada; considere induzir danos no DNA (por exemplo, tratamento com UV ou hidroxiureia) para enriquecer locais ligados ao RPA e verificar o desempenho.
• Em aplicações de IP e ELISA, faça um pré-teste do anticorpo sob suas condições específicas de tampão, pois ele reconhece um epítopo linear. Inclua controles apropriados.
• Valide a especificidade do anticorpo em seu sistema usando amostras de knockdown mediado por siRNA ou knockout por CRISPR/Cas9.

CamelBio: Sua Ponte de Abastecimento Completa

A CamelBio fornece aos fabricantes de diagnósticos e pesquisadores um portfólio abrangente de matérias-primas para IVD, incluindo anticorpos monoclonais validados como este clone anti-RPA70/RPA1. Além de reagentes individuais, facilitamos o abastecimento em massa e personalizado de reagentes auxiliares, anticorpos para alvos raros e consultoria técnica para desenvolvimento de ensaios nas áreas de pesquisa de dano, reparo e replicação de DNA. Parceire conosco para otimizar sua cadeia de suprimentos do conceito à clínica.