Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RPN1 para WB, IHC-P, ELISA - P04843

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RPN1

• RPN1 codifica a subunidade de 67 kDa da doliquil-difosfo-oligossacaril-proteína glicosiltransferase, também conhecida como Riboforina I (RPN-I), um componente central do complexo oligossacariltransferase (OST).
• O complexo OST catalisa a etapa inicial da N-glicosilação, transferindo um glicano pré-montado do dolicol-pirofosfato para resíduos de asparagina dentro de motivos Asn-X-Ser/Thr em polipeptídeos nascentes (PubMed:31831667). Referências relacionadas: PMID:31831667
• RPN1 é uma proteína de membrana integral do retículo endoplasmático (RE) e associa-se ao complexo translocon Sec61 para facilitar a glicosilação cotraducional.
• Todas as subunidades do OST, incluindo RPN1, são necessárias para a atividade catalítica máxima, destacando seu papel indispensável no processamento de proteínas.
• A localização subcelular inclui a membrana do RE e, adicionalmente, os melanossomos, conforme identificado por meio de análises proteômicas.
• É expressa ubiquamente em todos os tecidos testados, consistente com uma função fundamental de manutenção na biossíntese de glicoproteínas.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e ubiquitinação, que podem regular a estabilidade ou as interações da proteína.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 20-280, correspondendo a uma região conservada da RPN1 humana; espera-se reatividade cruzada com camundongo e rato com base na homologia de sequência.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de 69 kDa, mas a proteína endógena pode migrar de forma diferente devido à glicosilação ou a outras modificações; considere o uso de enzimas de desglicosilação caso sejam observadas bandas anômalas.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), os métodos de recuperação antigênica devem ser otimizados, e tecidos com alta atividade secretora (por exemplo, fígado e pâncreas) podem servir como controles positivos.
• Valide o desempenho do anticorpo na aplicação pretendida utilizando controles apropriados, como linhagens celulares com knockdown ou knockout, para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, pode ser necessário realizar o pareamento com um anticorpo de captura ou otimizar as condições de revestimento, pois esta preparação policlonal contém múltiplas reatividades contra epítopos.

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