Anticorpo Policlonal Anti-RPN2 para WB, ELISA - P04844

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RPN2 (Subunidade 2 da Doliquil-difosfooligossacarídeo--proteína glicosiltransferase)

• RPN2, também conhecido como riboforina II (RPN-II) ou RIBIIR, é a subunidade de 63 kDa do complexo oligossacaril transferase (OST). Referências relacionadas: PMID:31831667
• O complexo OST catalisa a transferência cotraducional de um glicano pré-montado (Glc₃Man₉GlcNAc₂) do dolichol-pirofosfato para resíduos de asparagina em motivos de consenso N-X-S/T, iniciando a N-glicosilação de proteínas no retículo endoplasmático (RE).
• RPN2 é uma glicoproteína integral de membrana com uma sequência sinal e um domínio transmembrana, localizando-se na membrana do RE em associação com o translocon Sec61.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo N-glicosilação e ubiquitinação (formação de ligação isopeptídica).
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de RPN2, potencialmente modulando a composição e função do complexo OST.
• RPN2 é expresso de forma ubíqua em tecidos humanos, consistente com seu papel de manutenção na biossíntese de glicoproteínas.
• Estudos estruturais 3D elucidaram a arquitetura do complexo OST, fornecendo insights sobre o reconhecimento do substrato e o mecanismo catalítico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A sequência do imunógeno (aa 360-540) corresponde à região C-terminal do RPN2 humano, que é altamente conservada entre os ortólogos humano, de camundongo e de rato, suportando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot (WB), o peso molecular teórico é de 69 kDa; no entanto, a proteína nativa é altamente glicosilada e pode migrar para um peso molecular aparente mais alto. Considere o uso de uma enzima de deglicosilação para confirmar a identidade da banda ou para resolver a heterogeneidade da glicosilação.
• Em aplicações de ELISA, faça a titulação do anticorpo e valide a especificidade usando proteína RPN2 recombinante ou lisados celulares que expressam o alvo.
• Este anticorpo policlonal também pode ser explorado para imunoprecipitação (IP) ou imuno-histoquímica (IHC), mas uma otimização completa no sistema de amostra relevante é recomendada.

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