Anticorpo policlonal anti-RPRD1B para WB, IHC-P, ELISA - Q9NQG5

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de RPRD1B

• RPRD1B (também conhecido como CREPT, proteína relacionada ao ciclo celular e com expressão elevada em tumores) é uma proteína nuclear que regula a transcrição ao interagir com o domínio C-terminal (CTD) fosforilado da subunidade POLR2A da RNA-polimerase II.
• Participa da desfosforilação do CTD por meio de RPAP2 e aumenta a expressão de CCND1 (ciclina D1), promovendo a ligação da RNA-polimerase II ao promotor de CCND1.
• RPRD1B impede que a RNA-polimerase II ultrapasse o sítio de terminação na extremidade 3' e pode facilitar sua reciclagem para o promotor por meio da formação de alças de cromatina.
• Também regula positivamente outros genes relacionados ao ciclo celular, como CDK2, CDK4, CDK6 e ciclina E, sem afetar CDKN1A, CDKN1B ou ciclina A.
• Localizada exclusivamente no núcleo, RPRD1B é uma fosfoproteína e uma proteína acetilada, conforme identificado por análises proteômicas.
• É expressa preferencialmente em diversos tecidos tumorais (cólon, pulmão, fígado, mama, próstata, estômago, endométrio uterino e cânceres cervicais), com níveis mais elevados do que nos tecidos não tumorais adjacentes, sugerindo um papel na proliferação e na oncogênese.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 80–326 da RPRD1B humana; o anticorpo policlonal pode reconhecer múltiplos epítopos nessa região. Para controles positivos, considere utilizar proteína recombinante de comprimento total ou lisados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato.
• Na análise por Western blot, espera-se uma banda próxima a 37 kDa. Valide a especificidade com condições adequadas de bloqueio e detecção e inclua marcadores de peso molecular.
• Para IHC-P, pode ser necessária a recuperação antigênica. Teste em tecidos tumorais com superexpressão conhecida de RPRD1B (por exemplo, câncer de cólon ou de mama) e inclua um controle negativo para confirmar a especificidade da coloração.
• Este anticorpo pode ser utilizado em ELISA; para formatos de captura/detecção, a combinação com um anticorpo monoclonal de alta afinidade pode melhorar a sensibilidade.

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