Anticorpo Policlonal Anti-RPS27A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P62979

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RPS27A

• O RPS27A codifica uma fusão de proteína ubiquitina-ribossomal que é processada pós-traducionalmente para gerar ubiquitina livre e a proteína ribossomal eS31 (também conhecida como S27A), ambas desempenhando papéis essenciais na homeostase celular.
• A porção de ubiquitina deste precursor participa de diversos processos dependentes de ubiquitina, incluindo a degradação de proteínas via cadeias de poliubiquitina ligadas por Lys-48 que direcionam substratos ao proteassoma, bem como funções não proteolíticas, como reparo de DNA (ligadas por Lys-6), endocitose e sinalização NF-kappa-B (ligadas por Lys-63), e regulação do ciclo celular (ligadas por Lys-11 e Lys-29).
• A proteína ribossomal eS31 é um componente integral da subunidade ribossomal pequena 40S e contribui para a montagem do processoma da subunidade pequena (SSU) no nucléolo, onde auxilia no dobramento, modificação e clivagem do pré-rRNA durante a biogênese dos ribossomos. Referências relacionadas: PMID:23636399 PMID:9582194 PMID:34516797
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, com enriquecimento no nucléolo, consistente com seus papéis duplos na sinalização de ubiquitina e na produção de ribossomos.
• Modificações pós-traducionais da proteína de fusão incluem acetilação, ADP-ribosilação e fosforilação, que podem regular seu processamento, estabilidade ou interações.
• O RPS27A contém um domínio dedo de zinco e motivos de ligação a metais, sugerindo papéis estruturais na montagem ribossomal ou funções relacionadas à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a proteína de fusão de comprimento total (aminoácidos 1–156); o anticorpo policlonal resultante pode reconhecer epítopos dentro da ubiquitina, eS31 ou ambos. No Western blotting, considere que bandas correspondentes à fusão não clivada (~18 kDa), ubiquitina livre (~8,5 kDa) e eS31 (~15 kDa) podem aparecer dependendo do status de processamento de ubiquitina da amostra e dos epítopos reconhecidos.
• Para IHC-P e IF/ICC, o padrão esperado de coloração subcelular inclui sinais citoplasmáticos, nucleares e nucleolares. Valide a localização por coloração simultânea com marcadores para esses compartimentos.
• Em aplicações de ELISA, use RPS27A recombinante de comprimento total ou ubiquitina/eS31 purificados como antígenos de revestimento para avaliar a especificidade e o título do anticorpo.
• Espera-se reatividade cruzada com camundongo e rato; no entanto, verifique sempre o desempenho em seu sistema modelo específico com controles positivos e negativos apropriados.

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