Anticorpo Policlonal Anti-RPS27A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P62979

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RPS27A

• RPS27A codifica uma fusão de ubiquitina-proteína ribossomal que é processada pós-traducional para gerar ubiquitina livre e a proteína ribossomal eS31 (também conhecida como S27A), ambas desempenham papéis essenciais na homeostase celular.
• A porção de ubiquitina desse precursor participa de diversos processos dependentes de ubiquitina, incluindo a degradação de proteínas por meio de cadeias de poliubiquitina ligadas à Lys-48 que direcionam os substratos para o proteassoma, além de funções não proteolíticas, como reparo do DNA (Ligado à Lys-6), endocitose e sinalização de NF-kappa-B (Ligado à Lys-63) e regulação do ciclo celular (Ligado à Lys-11 e Lys-29).
• A proteína ribossomal eS31 é um componente integrante da subunidade ribossomal pequena 40S e contribui para a montagem do processossomo da subunidade pequena (SSU) no nucléolo, onde auxilia no dobramento, modificação e clivagem do pré-rRNA durante a biogênese ribossomal. Referências relacionadas: PMID:23636399 PMID:9582194 PMID:34516797
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, com enriquecimento no nucléolo, o que é consistente com seus papéis duplos na sinalização por ubiquitina e na produção de ribossomos.
• As modificações pós-traducionais da proteína de fusão incluem acetilação, ADP-ribosilação e fosforilação, que podem regular seu processamento, estabilidade ou interações.
• RPS27A contém um domínio de dedo de zinco e motivos de ligação a metais, o que sugere papéis estruturais na montagem ribossomal ou em funções relacionadas à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange toda a extensão da proteína de fusão (aminoácidos 1–156); o anticorpo policlonal resultante pode reconhecer epitopos dentro da ubiquitina, da eS31 ou de ambas. No Western blotting, considere que bandas correspondentes à fusão não clivada (~18 kDa), à ubiquitina livre (~8,5 kDa) e à eS31 (~15 kDa) podem aparecer dependendo do status de processamento da ubiquitina da amostra e dos epitopos reconhecidos.
• Para IHC-P e IF/ICC, o padrão de coloração subcelular esperado inclui sinais citoplasmáticos, nucleares e nuclolares. Valide a localização por meio de co-coloração com marcadores para esses compartimentos.
• Em aplicações de ELISA, use RPS27A de comprimento total recombinante ou ubiquitina/eS31 purificada como antígenos de revestimento para avaliar a especificidade e o título do anticorpo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é esperada; no entanto, sempre verifique o desempenho no seu sistema modelo específico com controles positivos e negativos apropriados.

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