Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RPS6KA4 para WB, IHC-P, ELISA - O75676

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RPS6KA4 (MSK2)

• Identidade proteica: RPS6KA4, também conhecida como MSK2, RSK-B ou S6K-alfa-4, é uma serina/treonina-proteína quinase de 86 kDa pertencente à família RSK. Codificada pelo gene RPS6KA4 (GeneID: 8986), o splicing alternativo gera múltiplos isoformas.
• Função central da quinase: Fosforila os fatores de transcrição CREB1 e ATF1 em resposta a estímulos mitogênicos (ex.: EGF) e de estresse (ex.: UV-C, anisomicina), regulando assim a expressão de genes imediatos precoces.
• Modificação de histonas: A MSK2 fosforila a histona H3 na Ser-10 (e possivelmente Ser-28), levando ao relaxamento da cromatina e ativação transcricional de genes como c-fos e c-jun. Também fosforila a HMGN1 (HMG14), modulando ainda mais a estrutura da cromatina.
• Sinalização inflamatória: Em macrófagos, a MSK2 atua a jusante do TLR4 para limitar a produção de citocinas pró-inflamatórias, induzindo DUSP1 (fosfatase de quinase MAP) e IL10 via CREB1/ATF1, destacando seu papel anti-inflamatório.
• Regulação da RELA: A MSK2 é essencial para a atividade transcricional da RELA (NF-κB p65) induzida por TNF, fundamentando seu papel na sinalização do NF-κB e na inflamação.
• Localização subcelular: Primariamente nuclear, consistente com sua função na fosforilação de fatores de transcrição e histonas. Palavras-chave associadas incluem núcleo, quinase, resposta inflamatória e resposta ao estresse.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo C-terminal (aa 673-772), garantindo o reconhecimento do RPS6KA4 de comprimento total. Valide a especificidade por competição com peptídeo ou experimentos de knockdown no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é ~86 kDa. Use controles positivos (ex.: HeLa, HEK293) e negativos apropriados, e considere inibidores de fosfatase para preservar epítopos dependentes de fosforilação.
• Para IHC-P, otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo. Valide a coloração em tecidos humanos ou de camundongo conhecidos por expressar MSK2 (ex.: células imunológicas, tecidos de alta renovação).
• Para ELISA, o imunógeno peptídico suporta formatos de ELISA direto ou sanduíche. Garanta testes de reatividade cruzada se usar amostras de camundongo.
• Sendo um anticorpo policlonal, espere alguma variabilidade entre lotes. Considere a validação funcional no contexto específico do seu ensaio.

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